MCAT ZEN - RAINING

"Please call me by my true name" - Thich Nhat Hanh

2013-05-05T12:52:00.003-07:00

"Please call me by my true name" - Thich Nhat Hanh

Don't say that I will depart tomorrow --
even today I am still arriving.

Look deeply: every second I am arriving
to be a bud on a Spring branch,
to be a tiny bird, with still-fragile wings,
learning to sing in my new nest,
to be a caterpillar in the heart of a flower,
to be a jewel hiding itself in a stone.

I still arrive, in order to laugh and to cry,
to fear and to hope.

The rhythm of my heart is the birth and death
of all that is alive.

I am the mayfly metamorphosing
on the surface of the river.
And I am the bird
that swoops down to swallow the mayfly.

I am the frog swimming happily
in the clear water of a pond.
And I am the grass-snake
that silently feeds itself on the frog.

I am the child in Uganda, all skin and bones,
my legs as thin as bamboo sticks.
And I am the arms merchant,
selling deadly weapons to Uganda.

I am the twelve-year-old girl,
refugee on a small boat,
who throws herself into the ocean
after being raped by a sea pirate.
And I am the pirate,
my heart not yet capable
of seeing and loving.

I am a member of the politburo,
with plenty of power in my hands.
And I am the man who has to pay
his "debt of blood" to my people
dying slowly in a forced-labor camp.

My joy is like Spring, so warm
it makes flowers bloom all over the Earth.
My pain is like a river of tears,
so vast it fills the four oceans.

Please call me by my true names,
so I can hear all my cries and my laughter at once,
so I can see that my joy and pain are one.

Please call me by my true names,
so I can wake up,
and so the door of my heart
can be left open,
the door of compassion.

1989

Medical School Interview Tips 医学院面试经验 http://mdinterview.blogspot.com/

A New Fun Meditation Site - Head Space by Andy Puddicombe

2013-03-04T13:25:00.001-08:00

Get Some Head Space

Andy Puddicombe, a meditation doctor for Tricycle, has started a practical meditation site for beginners.

On his site, there are several interesting cartoons that encourage meditation. My five-year-old son sits on my lap and watches these cartoons. Then he points to the table and says, "Mommy, this will be my meditation spot!" When I put him to bed that evening, my son asks me to meditate together with him. We decide to sit together for five minutes.

The starting bell rings. One minute later, Bobo starts to count the seconds on our meditation timers. Five minutes later, Bobo said, "Mom, now you go ahead and meditate, I will count the seconds for you." Together we sit there for fifteen minutes.

Andy Puddicombe also has a very practical post "Exploring Emotions" on The Tricycle Blog, which has been very useful for me to deal with the stress.

Exploring Emotions by Andy Puddicombe

As a researcher, I have been writing quite a few scientific manuscripts. The writing/revising processes are usually long and sometimes frustrating. Andy's method has helped me a lot to deal with the stress.

Here is a summary of his method in "Exploring Emotions" and how I apply his method. According to Andy's teaching, I come up with the Mantra - See, Sit, Breath

(1) See the emotion - what, where, how?
-What?
Q: What is the emotion?
My answer: I feel stress and depressed when I know the deadline is coming very soon.

- Where?
Q: Where is the emotion?
My answer: usually when I am stressful, I feel the stress in my heart and sometimes in my whole body.

- How?
Q: How does the emotion feel?
My answer: my heart is tight. My body is frozen.

(2) Sit with the emotion
"Relax" the tightness in my heart a bit and let the tightness "gently" sit on the heart.

(3) Breathe through the emotion
Breathe in and breathe out. Usually my meditation focal point is my breath. When under stress, as Andy suggests, I would use the tightness of heart as my focal point.

How to Reduce Stress
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The past five years

2013-02-25T17:41:00.001-08:00

We live at an area with many young families and little kids. This is a quiet night and from time to time we hear the barks of the dogs. My husband Wowo and I are both sitting in front of our laptops, he faces the window, I face the wall. Once a while he sends me a link of a funny video from youtube or a facebook update from our mutual friends.

Wowo claims himself to have Asperger Syndrome. I believe the real reason of his preference of Asperger Syndrome is his admiration for Einstein. Wowo also claims he has no friends. Facebook is such a wonderful thing. All my friends, male or female, have become Wowo's friends. And now Wowo is often the first one who tells me the news of my friends, or, his friends.

Wowo has formed the habit to always have his earphones on. When I talk to Wowo, sometimes he does not hear me. Sometimes he hears me, takes off his earphone politely, and gently smiles at me. Sometimes he is in the middle of thinking of something and is very surprised to hear me talk to him.

This is a silent night. A cry of a baby rises. The cry goes on and on. Wowo takes off his earphone and suspiciously looks around. He asks me, "Is Bobo crying?"

"No, not Bobo." I reply happily, "Bobo has not been crying like this in the past five years."

Wowo and I are both laughing. Bobo is now five years old.

Now I believe, parents could take pride in any achievement of their kids.

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A moment of embarrassment

2013-02-11T13:47:00.000-08:00

"Each time you meet an old emotional pattern with presence, your awakening to truth can deepen. There’s less identification with the self in the story and more ability to rest in the awareness that is witnessing what’s happening. You become more able to abide in compassion, to remember and trust your true home. Rather than cycling repetitively through old conditioning, you are actually spiraling toward freedom. "

- Tara Brach, "Finding True Refuge"

Went to Costco on Friday. The parking lot was crowded. I was a little bit of confused at a crossroad, lingered in front of a stop sign a sec longer, and then horned by the car behind me, impatiently.

In a moment, I felt my heart was twitched a little bit and felt the embarrassment. However, the feeling went away within seconds, I reminded myself to focus on the driving. After two turns and two more stop signs, I arrived at a perfect parking spot and the unfriendly horn becomes an insignificant event of that day.

If I were to focus on that horn, I might have amplified the negativity - "unfriendly", "threatening", "why could not I drive better", etc. But when I touched the emotion and went back to be aware at the driving, the event was just an event, like all these events on that day.

Thanks Tara for her wise words.

Finding True Refuge, By Tara Brach, in Tricycle
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From mindful.org - Liberating the Tortured Writer Within

2012-09-16T21:48:00.003-07:00

From mindful. org

liberating-the-tortured-writer-within

"But what was underneath all this torture? Quite a few unskillful habits, most of which were related to ego:

A desperate need for some kind of approval: basing one's self esteem on the opinions of others.
- Over identification with my work—mistaking my work for my actual life.
- A constant striving for a future moment that would be better than this one.
- A clinging to suffering, an addiction to the highs and lows of it, including endless speculation on whether I was "good enough."
  
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Molality vs Molarity

2012-07-09T17:06:00.005-07:00

Molarity

Molarity is moles of solute per volume of solvent.
Molarity = # moles of solute/# liters of solvent

Molality

Moles of solute per mass of solvent.
Molality (m) = # moles of solute/# kg of solvent

Molarity
Molality

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"Always meditate on whatever provokes resentment"

2012-06-06T00:38:00.004-07:00

"Everything in our life that disappoints us is a kind friend."

-- Joko Beck

Recently I have learned two slightly different meditation techniques. One is from Adeu Ripoche, the other is from Joko Beck and Judy Life. Both techniques are very helpful.

Here's a brief summary.

(1) When a thought arises, disengage from it, and pull your attention back to an empty place.

Pay attention to occurrence, stillness, and noticing.

a. Occurrence - the rising of a thought

b. Stillness - whenever a thought arises, disengage from it, and place your attention in a quiet place. This quiet place can either be the breath or the empty mind.

c. Noticing - notice the "awake quality"

Adeu Riphoche also says, "the cultivation of stillness means to train in cutting off involvement in memories; you disengage from entertaining any thought about what has happened in the past. The same with regards to the future: you are not suppose to construct any plans about the next moment. And in the present, right now, simply and completely let go. Drop everything and settle into nowness. In the mahamudra tradition, stillness refers to not following thoughts about the past, present, and future - not churning out any new thoughts. "

(2) When a strong negative emotion arises,

a. Know it clearly as anger, fear, or resentment,

b. wait a bit,

c. then pay full attention to the body sensation the emotion evokes.

Joko Beck also says, "Benoit’s term for the emotional contraction arising from our efforts to protect ourselves is 'spasm.' He calls the ceaseless chatter of our internal dialogue 'the imaginary film.' The turning point for him comes when he realizes 'that this spasm, which I have called abnormal is on the road that leads to satori (enlightenment). One can indeed say that what should be perceived, under the imaginary film, is a certain profound sensation of cramp, of a paralyzing grip, of immobilizing cold…and that it is on this hard couch, immobile and cold, that our attention should remain fixed; as though we tranquilly stretched out our body on a hard but friendly rock that was exactly molded to our form.”

Joko Beck has the metaphor that she images her sitting on a hard and cold couch, that which is the fixing point. "Instead of remaining with our thoughts, we label them until they settle down a little and then we do our best to stay with that which really is, the nonduality that is the sensation of our life at this very moment."

(3) "Always meditate on whatever provokes resentment"

- One of the lojong slogens.

Judy Life in her article "I want to be skillful" in Shambhala encourages us to "always meditate on whatever provokes resentment." This Atisha slogan echoes well with Joko Beck's point of view that

"there is no insult", "there is only opportunities" for us to practice.

(4) My real life example

I have a paper need to be revised and this project has been delayed for at least four months. I love the topic; however, I was not able to deal with the rejection of the paper, which occurred once. Since January, every time I thought about the paper, I knew I should start working on it. However, the unpleasant feeling of rejection would be inevitably evoked and I always chose to do something else.

After reading Joko Beck and Judy Life's articles, I began to take difficult situations in my life as opportunities, instead of "difficulties" or "rejections". This afternoon, I thought about the paper and felt the unpleasant emotion representing "rejection" immediately. However, instead of numbing myself with a comedy or a cup of double chocolate frappuccino or diving into easier and less stressful project such as speed read training (as I usually did), I reminded myself that this is an opportunity for my practice. I looked into my emotion - the body sensations and felt how tight my chest was and the toughness of my throat. I kept paying attention to the sensations for a while. Then I noticed that these sensations were not that hard to deal with. What have prevented me from this project is not these sensations, which were actually as neutral as any other sensations. What have prevented me from this project is my imagined film about "rejection and pressure".

Then I noticed that the revision of the paper was not as hard as I thought. Keeping paying attention to the tightness of my heart, I found no difficulty to work on the paper.

Thanks for reading this post. I will be very happy if my experience can help you a little bit. Please leave comments if you need any further help.

To read more

Adeu Ripoche - Freedom in Bondage

Adue Ripoche - Two Great Paths (in the Buddhadharma)

Beck, Charlotte J.; Smith, Steven A. (2009-03-11). Nothing Special (p. 125). Harper Collins, Inc.. Kindle Edition. "

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The egoist

2012-05-27T21:12:00.001-07:00

http://www.psychologytoday.com/articles/201204/the-high-art-handling-problem-people?page=3

"Telltale signs: Own interests come first, last, and always. Takes everything personally. Unable to compromise, ever. Insists on being seen as right by everyone.

Where you'll find them: Reality TV shows. Congress. Art school.

Call in the wild: "It's my way or the highway."

Notable sightings: Donald Trump. Kanye West. Chris Christie. Paris Hilton.

Our culture devalues stoicism and rewards overreacting to every little thing, especially on reality TV.

This is a group of people—Leary sees their numbers increasing—whose ego is far too involved in anything that happens. As a result they take everything personally. What makes them difficult is their fierce demands coupled with their inability to compromise. They frequently "lose it." Mention a problem to them and they immediately assume you are blaming them. "On top of the tangible problem, they add a layer of symbolism that makes everything about them," says Leary. "They live their life according to the symbolic meaning as opposed to solving the problem."

Leary argues that both egoic and egocentric individuals view the world through a self-centered lens, but the egoic are especially inclined to respond strongly when their desires are not satisfied. (Egotism, by contrast, refers to an inflated sense of one's positive qualities.)

Leary, who has long identified problems of the self, says, "This type hit me when I saw Congress discussing the debt ceiling. There was so much posturing—'I have to show everybody I'm right'—rather than movement toward solving the problem." The egoic person is convinced his ideas are 100 percent right—and must be seen as right. Further, he feels entitled to have things happen his way. "A person who is convinced his perspectives, beliefs, and values are right cannot tolerate any conciliatory conversations. It's 'my way or no way.' " Politics is not the only home of the egoic. "These people wreck relationships, work, even societies," observes Leary."

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7 ways to Defuse a Difficult Encounter

2012-05-27T21:07:00.000-07:00

http://davidaedwards.tumblr.com/post/22196938866/7-ways-to-defuse-a-difficult-encounter

http://www.psychologytoday.com/print/93777

Minimize time with problem people. Keep interactions as short as possible.
Keep it logical. Communications should be fact-based with minimal details. Don’t try to connect and reason with difficult people. Their response will often only make you more upset.
Focus on them in conversation. One way to avoid being the target of demeaning comments, manipulation, or having your words twisted is to say as little as possible. They are a far safer subject of conversation than you are.
Give up the dream that they will one day be the person you wish them to be. There are people in our lives who have moments when they seem to be the parent/partner/spouse/friend/whatever we’ve always wanted. Yet they end up disappointing or hurting us. Accepting the person as is can be a remarkable relief.
Avoid topics that get you into trouble. Before any interaction with a difficult person, mentally review the topics that invite attack and make an effort to avoid them. If your in-laws always demean your choice of career, change the topic immediately if they ask how your work is going.
Don’t try to get them to see your point of view. Don’t try to explain yourself or get them to empathize with you.They won’t. And you’ll just feel worse for trying.
Create a distraction. Play with a pet if there is one handy. Plan the interaction around some kind of recreational activity or entertainment. Or get the other person to do something that absorbs their attention (taking it off you). Just don’t use alcohol as your distraction of choice. It will only make you more likely to say or do something that will set you up as a target or make you feel bad later.

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How to change the negative topic of a conversation?"What is important to remember is..."

2012-05-26T21:01:00.001-07:00

Quotes from Carmine Gallo, in Real Simple

How to change the negative topic of a conversation?

"Deflect"

"In media training, I teach executives how to take control and a Q-and-A session. I have found that the best method is to use a conversation technique called 'the bridge', which is a phrase that helps you seque into the subject you want to talk about. One of my favorites: 'what's important to remember is, ...'"

Let's take one example. Say a job recruiter asks for your thoughts on a recent scandal at your alma mater. First vocalize your opinion, even if it's just to say, 'I think the whole thing is reprehensible.' Then, to direct the talk away from the sticky matter, go right into the bridge. 'But what's important to remember is that the university is one of the great research institutions in our country, and I'm very proud to have gone there.'

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Brad Warner - "How to not Waste Time"

2012-05-18T22:39:00.001-07:00

Also on the Summer 2012 of Tricycle

How to not Waste Time

"The best way I know of t to learn how to not waste time is to practice not wasting time. Every day, set aside a few minutes during which you vow to experience fully whatever comes your way. I'm not saying you should try to concentrate on being "in the moment", whatever it means. Don't try to do anything at all except what you're doing, which will seem like nothing to most observers. Little do they know! Even if what you're doing is being distracted and hating sitting on your cushion accomplishing nothing - just do that. Don't try to be anything other than who and what you are. As the old Zen saying goes, 'if a clear mind comes, let it come. If a cloudy mind comes, let it come.' Then you're not killing time. You're learning how to make it come alive."

Very useful tips for premeds, whose major task in life is studying, studying, and studying.

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Andrew Olendzki Finding the center

2012-05-18T22:37:00.001-07:00

The Still Center of the Mind is a Place of Universal Refuge

In this short article, Andrew Olandzki teaches us how to find the balanced center of our practice. Imaging we are in a room with four walls, alone. Between restless and drowsy, we found a calm but alert mind. Between desire and pain, we found equanimity.

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"Pre-Med's New Priorities" -- from New York Times

2012-05-14T11:50:00.002-07:00

Pre-Med's now have one more thing to worry about for MCAT, in addition to organic chemistry, physics, or the all-challenging verbal section. Starting from 2015, a new section with psychology and social science will be incorporated in MCAT. Good news or bad news?

Pre-Med’s New Priorities: Heart and Soul and Social Science
A Second Opinion: The Post-Baccalaureate

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"Real but not true" - thinking about our emotions

2012-05-09T12:46:00.001-07:00

Real But Not True

Excerpt is as follows. -- Tsoknyi Rinpoche

"I invite you now to participate in a little mantra exercise when faced with the strong emotions that arise in various situations in your life -- for example, being stuck in traffic and being late for work or a meeting; dealing with a coworker, a manager, your spouse, partner, or children; or talking with bank officials.

Take a nice, deep breath, observing your inhalation and exhalation. Then take a moment to greet your feelings as guests. Say "Hello," and start a conversation. You can begin by saying something like "Yes, I know that you're real."

Then ask "Are you true? Are you based on present conditions, or are you based on past experiences?"
Ask yourself again and again if what you're experiencing is real or true, until mentally and emotionally you can accept your feelings as real but the conditions on which they're based as possibly not true."

I found the above message very powerful and will try to follow it in the following days :)

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How muscle contracts? -- An excellent youtube vedio

2012-04-25T15:43:00.002-07:00

http://wn.com/Muscle_Contraction

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RAINING - How to Reduce the Stress

2011-12-18T22:44:00.000-08:00

Wonderful suggestion to reduce stress -- From A mindfulness-Based Stress Reduction Workbook

RAIN

R - Recognition of your anxiety and stress

A - Allow the anxiety to be with you

I - Investigate the anxiety

N - Not-identification (do not identify yourself with the anxiety), who is the self?

I - What can I do to solve the problem?

N - Not

G - Generalize. Don't generalize the negative emotion. Be specific of the causes of the anxiety and check what you can do about it.

What is next?

a. Don't generalize the anxiety. Be specific - what causes the anxiety.

b. Don't panic. Be specific - what can I do to solve the problem?

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Five Tips to Enhance Neurogenesis

2011-12-17T21:42:00.000-08:00

Enhancing neurogenesis, five ways...

http://positiveenergyvibe.wordpress.com/2011/07/07/five-easy-ways-to-grow-your-brain-power/

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Can Diasteriomers be separted by fractional distillation?

2011-11-08T13:46:00.000-08:00

Answer will be given on 11/9/2011

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出离 -宗萨钦哲仁波切开示

2011-11-08T13:33:00.001-08:00

发信人: liozodell (山水白鹤), 信区: Wisdom
标题: 出离 -宗萨钦哲仁波切开示
关键字: 佛，出离，开示，生气，修行
发信站: BBS 未名空间站 (Fri May 20 18:36:47 2011, 美东)

宗萨钦哲仁波切开示－

如果你出离了所有的执着，
那么你就会变得非常自由，
没有任何事情可以激怒你或伤害你。

在佛教里，出离有很多种含义和解释，
我遇到的很多人都把佛教的出离理解为远离人世，
就像悉达多太子曾经做过的那样，
不过这种解释容易把尚未准备好的人吓跑，
佛陀并不打算剃光每个追随者的脑袋。

对于生活在城市里，喝桶装水，
每天坐地铁上下班的人来说，
悉达多的出离在多数时候
只能是一种遥远的梦想。
他们可能并没有太多的选择余地。

如果你想修行佛法的话，
你可能只能在这样的环境里修，
在地铁里，在公司里，在下班的路上，
在晚饭之后。但你同样可以出离，要知道，
出离心并不只有一种表现形式。

如果你想知道自己是否具有出离心，
可以以这种方法检验：
在过去对你很重要的一件事，
现在是否对你一点都不重要，
过去可以轻易激怒你的事，
现在你是否毫不在乎。

如果是的话，
那么你就从这里出离了。你需要出离的东西很多， 并不只是不抽烟不喝酒或不
打牌， 那只是开始。

所谓出离，
就是不再执着过去执着的事物。当你不再执着一件事物或一种习惯， 它就失去
了指挥摆布你的能力。 你也就获得了自由。

从这个意义上来说，
你必须出离所有的事物， 才能获得彻底的自由， 我这里所说的所有的事物当然
不止是那些看得见摸得着的东西， 也包括很多细微的东西。
例如，如果你看到一个观点，这个观点令你不舒服， 那么说明你执着于一个相
反的观点。这个观点奴役着你，所以你会不舒服。

这样的事情也应该出离。
不管这个相反的观点正确与否，
或是谁说的，如果他可以让你不舒服，
那你已经被攻陷，你都应该从那里出离。
应该指出的是，佛教所有的观点都是 为了破除另一些观点而出现， 但它不应该成为你的新主人。

你也许经常会变得很生气，
那是因为你的生活里总是出现与你所预期的相反的东西。

例如，你请的临时工可能让你非常不舒服，
仅仅是因为她擦桌子的方式与你不同，
你很不喜欢她那种看上去非常笨拙的擦法。
甚至有时候你在街上看见一些打扮夸张。
把头发染成绿色的人也会生气。
那是因为你执着于古老的审美观。

要摆脱这种不爽的心态，
有两种方法，一种是你改变心态，
不再执着于每个人必须按照你的方式去做事的想法。
还有一个就是换一个擦桌子的方式和你所期待的一样的临时工。

很显然，前者是一劳永逸的方法，
佛教用的就是这种方法。
后者只能暂时解决问题，
你可能必须不断地更换临时工，
这也是很多人不断更换老公老婆的原因。

你可能花了很多时间找到一个照你说的方式去擦桌子的临时工，
但你很快会发现，她上厕所的时候居然忘了冲马桶。

因此，试图以改变外在的世界来追求完美是徒劳无功的。永远会有你意想不到的事情出现， 把毫无准备的你激怒。

你有多少执着，就有多少痛苦，
要摆脱痛苦，你必须从所有的执着里出离。
当你生气的时候你应该看一下自己的心，为什么会生气。

是否因为出现了与你期待正相反的东西。
你的期待，就是你所执着的东西。

佛陀不会被任何事情激怒， 因为他出离了所有的执着。

你可能因为任何事情生气， 你可能因为公共汽车开的太慢而生气。
可能因为找不到所需要的东西而生气（她把东西放哪了？她总是乱放东西。）
甚至可能因为你想让他生气的人不生气而生气。
这说明你非常脆弱。你很容易被激怒。

在经过一段时间的修行之后， 你可能还是未能了悟空性， 也不知道金刚经在说什么。
但你还是和过去有所不同，
过去你是个追求完美的人,
而现在你已经可以容许很多不完美的事在自己的生活中出现。例如，你可以吃一道比较
咸的菜而不会抱怨。

所谓完美主义者，也就是说， 你希望所有的事情都要达到你所希望的样子，你希望住在墙壁是天蓝色的屋子里， 如果不是，你就会睡不着觉。
你不喝桶装水之外的任何水，
你希望用自己喜欢的杯子喝茶，
希望茶的味道不要太浓也不要太淡。

做一个完美主义者的坏处就是， 你会经常痛苦， 因为这个世界上多数事情都 不会轻易俯首听命， 它们不会事事顺着你。

要让他们达到你所希望的样子，
你必须花很多时间。
很多人试图创造完美的世界，
不过他们最终都被证明失败了。

事实上，
只要把你的心稍作调整，
一切都会很完美。你之所以看到的是一个不完美的世界， 是因为你有各种执着和不切实际的期待， 如果你可以从这里出离， 你会变得非常强大。

你不再坚持必须住在有蓝色墙壁的屋子里， 不再坚持必须喝桶装水， 不再坚持必须用自己喜欢的杯子喝水， 不再坚持茶的味道必须不浓不淡。

如果你出离了所有的执着，
那么你就会变得非常自由，
没有任何事情可以激怒你或伤害你。

阿弥陀佛

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内观的开发-阿姜念

2011-11-08T13:21:00.000-08:00

The following is the meditation techniques I am trying to follow. Thanks for SeeU to post it. And thanks for Achaan Naeb for the original post.

http://www.mitbbs.com/article/Wisdom/31499675_3.html

发信人: SeeU (See you), 信区: Wisdom
标题: 内观的开发-阿姜念
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Apr 23 21:59:00 2011, 美东)

第八章　阿姜念 ACHAAN NAEB
内观的开发
http://nt.med.ncku.edu.tw/biochem/lsn/Theravadian-Masters/chap0
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        由于我们总是希望现状能改变，
        因而没能清楚地看到当下现况；
        如果我们注意到的不是现况，
        这样的修行就是离开了中道。
        我们可以看出，
        建立平衡中道并非易事；
        基于这个理由，
        具足正见是极其重要的，
        我们必须了解，
        内观并不是出自努力或深定，
        而是出于正念。

阿姜念（Achaan　Naeb　1897～1983）出生于一个与缅甸毗邻的泰国省份的省长家庭，她在三十五岁时，在阿姜帕吞塔（Achaan　Pathunta　U　Vilasa）的指导下，学习佛教心理学与内观禅修法。十二年后，她开始教导别人，并于许多寺院建立禅修中心，最后是在皇家的赞助下，于曼谷的金山寺（Wat　Sraket）创立「佛教研究与心灵福祉协会」（Buddhist　Rearch　and　Mental　Welfare　Association），接近七十岁时，她仍然从事教学工作；她的学生也承续她传播内观修行的工作。

金山寺是位于现代曼谷市中心一个安静、清凉的讲堂兼精舍，参访阿姜念就可听闻清晰而直接佛法的机会。

首先她可能指示来访者舒适地坐著，然后要求他们不要动。当然，访客很快就会自动地改变姿势。「等等，不要动！你为什么移动呢？还不要动。」阿姜念的教学就是如此直接指向苦的最明显根源──我们的身体。如果我们只是停在某个姿势，试著不要动，最后，苦会持续增加，逼使我们改变姿势。我们整天的动作几乎都是依循相同的模式。睡醒后，我们起床，然后至厕所解除膀胱的尿涨，接著我们会吃东西以纾解饥饿的难过，然后我们坐下，来减轻站立的痛苦，随后我们阅读、或谈话、或看电视转移不安的心。我们又会移动以排除另一个不舒服的动作，每一个动作都不带来快乐，仅仅是为了纾解与生俱来就跟随著身体而无可避免的苦。阿姜念的教学非常简要，她指示我们观照日常生活与动作中出现的苦的因果，清楚觉知其中的过程就是苦的止息与获得觉悟之乐的直接门径。

阿姜念还提出许多重要的佛法观点，首先，她强调在实修之前必须具足正见，她表示，恒守中道并不容易，缺乏正见与警觉，智慧将无法开展；所谓正见就是知道如何正确地察觉心与肉体，也知道染著是如何经由贪而生起，而且能够清楚地区别「认识当下事物」与「发展定力」这两者之间的不同，知道前者是正确的练习，后者是不正确的练习。

她特别强调内观修行与定力修行的区别，修行中对定力或特殊养生法的黏著，会障碍智慧。内观只要直接观察当下的心与肉体，切勿强行作意或专注，当务之急是直接地认识在任何姿势下的心与肉体。我们将清楚地看到苦与不满足是如何驱动我们每天的动作，我们也将看到心与肉体是持续地改变，心与肉体是分别的，空无的。

阿姜念表示，只有在内观练习中，透过对心与肉体的直接认识，智慧才会生起。她强调佛陀教法的独特地方，是视四念处为通向所有内观的门径。她指出，只要练习观察当下，特别是我们的心、肉体，及一切动作的因果，就可以了，不需要再从事其他特别的事。

阿姜念鼓励我们如实地听闻，这样子就可以获得智慧，她说∶

如实地听闻，意思是在听闻时没有预设观念或意见，如果我们以封闭的心去听闻，我们的既定想法或意见将不可避免地会隐藏真相，在这种情况下，我们将无法获得智慧，因此应将这些放一边，以开放的心去听闻，不要去想「我们的」老师以前曾经教过的东西，也不应考虑说话者是谁，是否为我们的老师；不要对他有任何成见；我们必须以开放的心听闻，试著思惟这些话是否合理，是否会引导我们通往真理。

泰国的许多佛教中心是根据这个传统来教学的（缅甸也是如此），他们欢迎西方人士参访与学习，以亲自体会智慧与自由的成长。

内观的开发 ╱　阿姜念　著

两种开发心灵的方法

佛教有两种开发心灵的方法，一种是内观（毗婆舍那）的开发，另一种是定力（奢摩他）的开发。后者著重在专注力；一个人要不断地注意一个目标，而且专注力是依循单一的轨道，以趋向清澈的宁静境界，这种心灵的开发并不会带来对事实及其因果的了解，只会带来宁静。另一方面，内观的开发则要了解「存在的实相」，换句话说，就是要证知肉体与心。这种证知是开发内观的目标。

首先，我将解释在宁静的开发中，专注力的构成要素，这是因为专注力的开发不能同时用于内观的开发上，反之亦然。对此点请不要误解，一个人当然可以先进行宁静的开发，等待达到专注力了，再进行内观的开发，但是，把这两种方法混在一起用，却无法达到内观所预期的效果。

宁静的禅修是集中注意力在一特定目标上，在传统上，宁静禅修专注的特定目标有四十个∶十个是颜色与元素，十个是不净观，十个是忆念，四梵住（或四无量心），四个是没有边际的禅修，一个是对恶心食物的忆念，最后是对地、水、火、风四大的分析，这些对象都可以在开发宁静时用来做为禅修的对象。

专注于前面提到的四十种禅修对象并不会导向内观，因为内观禅修是以变动不居的心理状态与肉体做为禅修的对象。虽然专注的定力可以开发出心灵的巨大力量与极大的快乐，但是这种极乐是短暂的，与通向涅盘的正念大异其趣，只有内观修习才能止息忧伤。

在更深入地谈到内观开发之前，首先我们应该了解内观是什么，它的功能及用途是什么。简单地说，内观是一种智慧，让一个人看到心理状态与肉体是无常的或短暂的，不圆满的或苦的，无我或没有自我，我们认为会有「自我」或者「本我」或者「灵魂」，是出自对真相缺乏认识的误解，事实上，「自我」只不过是心理状态与肉体一连串快速生灭的活动而已。

知道内观是这种智慧，那么它又有什么功能呢？内观具有摧毁所有隐藏的烦恼、贪欲与错误知见的功能，至于用途，内观能开启我们认识心理状态与肉体的真实面貌。那么，所谓的真实面貌是什么呢？就是了解到心理状态与肉体不是永远的、充满苦的，而且不是身见、灵魂或自我；换句话说，内观的开发并不是创造出存在的三个特性（三法印）无常、苦与无我，也不会骗你认识这些特性。不！这三个特性是本来就在那里，无论任何人是否看到或了解它们，它们永远都存在，我们没有看到或认识这些特性的原因是使用错误的方法去理解与分析它们，只有透过正确的方法去开发内观，我们才能看到存在的真实面貌。

这就是开发内观的唯一目的，再也没有别的目的与这种心灵开发有关。我曾经听说，有人未曾研究过内观的开发，却宣称闭上眼睛就能看到天堂与地狱，另外有人宣称藉著内观的开发，能够帮人治病，使无法生育的人生下小孩；更有人宣称，藉著内观的开发，他们能看到彩券的号码，能够说出别人的未来，或者能够在空中飞、在水上走、在地底穿越，让自己隐形，或是成为千里眼、顺风耳，所有这些技能都不是发展内观的目的，也与内观没有任何关系，这些特殊能力都只是专注定力的结果。内观的唯一功能是摧毁染著以及诸如贪欲、邪见与无知等心灵的特质，它们是生死轮回的根源。这就是智慧的成长。

智慧有三个来源，即∶

一、来自听闻他人教法的智慧。
二、来自个人对存在的真理的思考与反省，于反省期间，能够暂时摧毁烦恼。
三、来自对无常、苦与无我三种特性亲身体会的智慧，这种实际体验就是内观智慧，藉著这个工具，烦恼可以完全而永久摧毁。

精通闻慧之后，接著会产生思考；对听闻来的智慧有了正确理解，然后才会有正念，而正念的结果是产生内观的智慧，内观智慧是奠基于前两种智慧。

没有任何世俗的智慧可以媲美这三种智慧，只有这三种智慧能够逐渐摧毁生起轮回的原因，一旦彻见存在的三特性，智慧就圆熟了，这样的认识是发展内观的主要目标，也是佛陀弘法的目的，就是要让众生认识与觉悟法──自然的真相。

其次，我们应该要了解，到底是什么因素让我们无法领悟到存在的三特性。佛陀曾经解释是那些因素障住智慧所发现的无常、苦、无我三特性；遮盖住无常的是连续性，一切状态是快速变化的，也就是说，心理状态与肉体是非常快速地生起与消逝，不过这个过程发生得太快，我们无法体会心理状态与肉体的生起与消逝，因此误以为心理状态与肉体是不变的，这就是连续性遮盖无常的情形。为了说明这种现象，让我们举看电影为例。虽然萤幕上出现连续的移动，事实上它不是由一个画面之投影造成，而是由数百张画面所构成的，一件事情快速地改变成另一件事情，让我们以为只有一件事发生，而不是由许多的个别事件形成；就像我们无法看到构成电影的许多个别画面，同样地，我们也没能看到事实上有许多的心理状态与肉体，尤其是心理状态与肉体之生灭速度比构成电影的个别画面快得多，这就是为什么我们要去体会其中的变化是非常困难的；当我们无法体会这个事实，认无常为常的幻象就发生了。

是什么遮盖住苦呢？佛陀说，这是由于不注意身体姿势所造成的。不去注意观察身体，我们不会体会到心理状态与肉体是痛苦的，而且苦是不断地压迫我们。当我们没有体会这个事实，错误的见解立即生起，我们会视生命、心理状态与肉体是美好的，是可以带来快乐的，对快乐的贪求立即随之而起，因此带来更大的苦。

是什么遮盖住无我呢？回答这个问题之前，我们要谈一些无我的特性。无我是佛教的核心，是与其他哲学、宗教不同之所在的教理。其他宗教需要一个基本的事物做为基础，或者是无上的领导者，或是一个永远的或神圣的事物，好让人们可以拥有或依赖；但是在佛教，我们发现每一件事情都是无我的，没有灵魂或自我，没有「万能者」，因此一切的存在都具备无我的特性。现在，是什么原因阻碍我们理解无我呢？
佛陀说是心理状态与肉体聚集在一起的综合认知，这给我们一个想法，误以为心理状态与肉体是一个完整而永恒的个体，接著我们就会有心理状态与肉体是圆融的、重要的，以及五蕴（色、受、想、行、识）是美好的观念，虽然我们可能已听过五蕴的生灭非常快速，我们无法分别每一个心理状态或五蕴，而体会其真正性质，我们之所以无法区别它们，就是我们无法体会无我的缘故。由于缺乏此种体会，才生起坚实或主体的迷惑，也就是说，相信有一个恒常的「我」或「自我」，这种现象发生之后，对主体的迷惑成为促成贪欲的心理因素。接著，贪会促使一个人以为心理状态与肉体是持久的，会带来快乐的。我们有必要修正这个误解，以了解存在的三特性，并成为自由的人。

心理状态与肉体有许多不同的变化，我们一般人无法分析他们，而且很难做到，除非我们∶一、开发内观，二、了解发展内观的原理，三、建立正确的目的。拥有正确的目的，我们才能够克服障碍，达到开悟的境界，否则，我们将屈服于贪欲与反覆幻想（或错误判断）的影响中，走向永无休止的生死轮回。

所谓正确的目的就是要了解内观主要是摧毁生、老、病、死的轮回痛苦；以及日常生活中较轻微的痛苦，我们要是想获得奖赏，或想产生超能力，或获得奇特的东西才来练习内观，我们就没有正确的了解内观的基本精神。

到目前为止，我谈到了发展内观的效果，仍未谈到如何练习。在发展内观的实际状况，是我们必须不断觉察心理状态与肉体，以便认识它们的特性，只有我们完全了解心理状态与肉体之后，对它们明觉的能力才能深化，这种心理发展必须依循佛陀在《念处经》中所教示的程序，在这部经中可发现内观的四种对象，即身体、感受、心念与法，这些内容大致可分为心理状态与肉体。

警觉身体姿势与心理状态

我们了解了内观禅修的基本理论之后，我们开始警觉身体的四个基本姿势与随行的心理状态，来发展内观，各位请记住，觉察身体姿势的目的是去清楚地看与生俱来的苦与痛，换句话说，一定要不断地警觉身体的移动与每一个姿势，如果我们不如此警觉，将永远无法体会苦的真正范围与性质，对于身体的每一个移动，我们必须勤加练习，加以觉察，譬如坐下、躺下、站立或走动，我们必须对每一个移动都能警觉。

当我们坐、立、躺或行时，我们应该全神贯注在肉体的姿势上，走路的姿势是肉体的移动，而不是脚接触地板，坐姿也是如此；我们必须小心地察觉整个坐姿，而不只是接触座位的肉体部位，肉体的「接触」与坐的姿势是不同的两件事，有时候练习者想要察觉坐的姿势，结果却是察觉「接触」，因此，他并没有察觉坐的姿势。如果练习者注意的是「接触」，那么他必定全神贯注在「接触」上，如果他注意的是坐的姿势，他必须注意正在坐的当刻。「接触」与坐的姿势具备不同特性，它们是不同的肉体，有不同的认识途径；它们在各方面都不同，当我们要观照任何事物，我们必须注意正确的对象。

我们也要注意在特定姿势中，各种心理状态与身体动作，无论我们是否正在做某件事情，还是在想著事情。我们以坐的姿势为例，我们应该意识到、注意到坐的姿势，而且我们必须体会坐著的姿势是肉体，而注意到那个姿势则是一个心理状态，我们必须区别肉体与心理状态的不同。当我们正在注意一个心理状态或肉体时，我们也必须知道是何种心理状态或肉体。藉著了解许多不同的姿势，我们将知道每一肉体的经验都不同。如果我们不知道这是在一特定时刻的「坐著的肉体」，或是我们只知道它只是肉体，我们就不算是练习正确的方法，因为我们仅仅知道它是肉体，并没有体会到肉体的分别与改变，我们将错误地以为只存在一串连续的肉体，而那「一个」连续肉体正在坐、立、行等等。当我们只是看到没有改变的肉体，相信有一个不改变的「自我」，这种邪见就会生起。因此，当练习内观时，我们必须在任何时候都去敏锐地警觉到，我们注视的是什么形态的肉体或心理状态，只要我们能迅速思惟任何形态的存在，我们将渐渐地能够分别它是一个心理状态或肉体。

这种情形就像我们开始学习写字，起初我们必须学习字母，认识它是a或b；我们必须学习与记忆每个字母的形状，如果我们不记得每个字母的形状，我们就无法阅读。有些孩子可以毫无困难地说出ABC，但是如果你要他们指出任何一个字母，他们做不到，这是因为不认得每个字母的形状。同样地，如果一个练习内观的人不能认识坐姿的特性，而只是对著自己说或想∶「坐、坐」，他就不算是正确地练习。练习内观却不了解心理状态与肉体的不同形态，就像是没有学习每个字母的形状就想读ABC，或是看著一列字母，却无法阅读。基于这个理由，我们必须试著去警觉肉体的每一个姿势与心理的每一种形态，以认识每一个的特别性质及它的不同──既然每一个都有它自己的特性。我们将因而可以看到这些状态不停地改变。如果我们以这种方式孳长智慧，我们将体会到心理状态与肉体的真正特性。

以无欲的警觉做正念

佛陀曾说，我们必须练习内观来看清实相，为了做到这点，我们首先必须摧毁对事物之黏著与厌恶，因此，当我们正在对心理状态与肉体做正念时，必须小心地观察，保持心理警觉。发展无欲的警觉是对正念的正确态度，就好像观看演员们在演戏，对还未上场的演员，我们不要想去看他，同样地，我们不要紧紧跟随著正要下场的演员，而只应将注意力放在正在演戏的演员；我们的唯一兴趣是在看演员表演，而不是在指挥它。我们是由五蕴（肉体与心──受、想、行、识）构成，五蕴就像一部电影，日夜不断地上演，甚至我们在睡觉、坐著或呼吸时亦然，它不断地以每一个呼吸、一进一出地演著，直到我们死亡，然后开始扮演另一个角色，如此无止尽地演下去，这就是所谓的轮回。

欲了解心理状态与肉体，不必到他处寻找。我们在练习时，对待任何事情都必须保持中性的感觉，就好像对待一位演员于任何时刻所扮演或出现的角色。我们必须像一个旁观者以中性的感觉保持觉醒，因此，如果我们的心在旁徨、徘徊，而我们并不喜欢它如此，这样的态度就不正确，正确的方法是去察觉徘徊、旁徨的本身；我们也应该确实明白，我们是在察觉旁徨不定的心理状态，我们必须理解，徘徊的心是一种心理状态，否则我们会误以为是「我」在徘徊，因而让我见继续存在，而不是在消除我见。

就像现在这样的分析，当我们在警觉徘徊的心时，我们应该检查并没有所谓让这个徘徊的心消失的欲望。

在对徘徊的心做禅修时，如果以为内观的目的是要让它消失，这种想法是完全错误的。内观绝对无法以这种方式达到，为什么呢？因为如此是错误地想要控制自然，幻想以为有一个「自我」可以控制心或强迫徘徊的心消失。现在，如果经由很大的努力而依我们的愿望让它消失，智慧不会因而产生，相反地，只会孳长对某些特别的心理宁静的错误看法与欲望，只要徘徊的心消失时，我们就会感到高兴，而且相信我们的禅修很有效，因而加深「自我」、「作者」之幻想。当徘徊的心消失时，取而代之的是专注或宁静的心，此时，我们感觉可以控制这个世界，而失去体会心理状态与肉体是无我的，终究不是一个人所能控制的。

没有人能够控制或指示心理或肉体的活动，维持至某种特定的形式，如果一个人错以为自己可以控制心理状态与肉体，这种想法只会带来误解，事实上，即使一个人不做禅修，也不用想让徘徊的心消失，它终究会消失的，因为任何生起的心必将消逝。所有的心理状态与肉体都具备三特性，如果我们没有机警地观照它们，那么误解会立即发生，贪、瞠或我见等烦恼跟著生起，而当烦恼出现时，它们会障碍内观。当心出现徘徊不定而禅修者不希望这件事发生时，不喜欢的感觉就会发生；当他有了不喜欢的感觉，会企图以极强的专注来获得稳定的心，并停止徘徊的心；换句话说，他的心是以宁静或愉快为目标，自己已经紧紧黏著于定境。正确禅修的人不应该生起黏著与厌恶。

禅修者不能经常保持正念的一个原因是没有正确认识正念的方法，例如，当他在注意一个姿势时，会发现苦迟早出现在那个姿势。当苦出现时，他应该去察觉这个苦，丝毫不要去压抑它，就如同察觉徘徊的心一样。如果我们藉著专注于苦以压制它，这样的念是以贪为目的，而不是仅仅去观察对象，这也表示追求中道的心理平衡所需的适当心理消失了，这是由于我们的意识转至好恶感的缘故，当我们要苦消失时，这是黏著，当苦并未消失而我们不喜欢它时，这是厌恶；如果苦正如我们所希望地消失，跟著来的是更进一步的黏著，这样的修行不是修正念的正确方法；而由于我们总是希望现状能改变，因而没能清楚地看到当下的现况；如果我们注意到的不是现况，这样的修行就是离开了中道。我们可以看出，建立平衡中道并非易事；基于这个理由，具足正见是极其重要的，我们必须了解，内观并不是出自努力或深定，也不是出于我们希望去知道或理解，而是出于正念。如果我们没有获得灵敏的觉察力，即使用再大的努力与定力，智慧也不会产生。

以这个演讲为例，当你们在听演讲时，从未练习正念的人只会获得少许的了解，而那些已经练习过正念的人则会对内观获得一些认识，而如果你非常敏锐，可能在听演讲时即得到深度的内观智慧；如果你有正见与正念，便可以在任何地方对正在发生的当下事实（不受我们的好恶所影响）进行禅修，如果我们以正见与正念去注意眼前的事实，我们可以在任何时刻达到解脱的第一个阶段。就如佛陀住世的时候，经常在他讲完话后，许多人会立刻达到不同阶段的解脱，因此内观是源于正见而非努力或深定。

注意姿势以体会苦的本质

现在让我们回到前面我所谈到的内容。为什么要注意姿势呢？因为我们这么做才能体会苦的本质；如果我们没有注意姿势，那么姿势如何能告诉我们苦的真相呢？再者，如果我们对正念的方法没有正确的了解，我们也不会体会苦。当改变姿势时，如果我们没有注意到旧的姿势是苦的，那么新的姿势可能蒙蔽了苦的真相。因此，我们必须保持警觉，很机警地发现我们改变姿势的原因。如果我们在改变姿势之前能看到原因，那么新的姿势就无法掩盖苦的真相。当我们随时都察觉姿势，会发现经过一段时间之后，苦必然产生，而且只有到那个时候我们才想要改变姿势。当某个姿势有了苦，我们便不喜欢那个姿势，而当某个姿势因为不再令人舒服而不喜欢它时，任何对那个姿势的欲望将会消失；当对那个姿势的欲望消失时，对那个姿势的厌恶会取代原有的黏著，厌恶的情绪跟随苦受而产生。

就变换姿势而言，虽然我们曾经喜欢旧的姿势，而现在却希望它消失，取而代之的是厌恶；当厌恶进入心中，因为新姿势比较舒服，欲望即黏著至新姿势，因此，我们可以看到，任何姿势都会有黏著与厌离，然而，修行者经常没有认识到这点。为了察觉到姿势，练习者必须了解到，改变姿势之前，他应该随时都清楚为何要改变姿势，如果我们不知道何以改变姿势，我们就无法也不会视苦为苦。我曾经问一个修行者是否知道他改变身体姿势的原因，其中一个回答是他坐太久了，只不过「要」换姿势而已。这样的回答当然是不正确的，他的这个原因至少没有把苦的真相显露出来。因此，我进一步问他，为什么坐久了就必须改变姿势，其中必然另有原因或理由。坐久了而令人「要」换姿势并非真正的原因，修行者必须找到更精确的理由，例如，是什么理由迫使一个人「要」改变姿势？如果他是以这种方式追问，会发现自己因受到苦的影响，而被迫改变姿势。任何时刻都是苦在逼迫一个人改变姿势。

现在，让我提出反面的问题。一个人可以保持一个姿势而丝毫不动或不改变吗？答案当然是否定的。即使我们不想变换姿势，不也是被迫去改变姿势，完全不依循我们的愿望吗？我们在前面提到，有人认为是因为自己想坐，所以坐下，自己想站，所以站立，现在是否也可以说，因为想要坐下或改变姿势，所以这么做？就如刚才说的，我们是因为痛或苦，是因为不舒服，所以改变姿势。这就是为什么修行内观的人，必须找到每次改变姿势的原因；他必须了解到，每次改变姿势都是出于痛或苦，如果任何时刻都能以这种方式理解姿势的改变，而对当下的事物念念分明，我们将体会存在的基本特性。

现在，当我们体认到我们是因为苦而被迫改变姿势，我们应更进一步质疑，找出是否另有别的理由，如果回答是为了舒服所以改变姿势，这是不正确的，因为这是对快乐的扭曲。正确的答案是我们为了治痛才改变姿势，不是为了追求快乐而改变姿势。错误的回答是出于误解，如果对改变姿势的原因没有正确的认识，烦恼会因而孳长。

变换姿势以对治痛苦的现象，显示我们随时都必须治疗它们，既然随时治痛的情形与不断吃药的情形类似，我们不应该误以为变换姿势的理由是为了求得快乐。这就像慢性疾病的疗养一样，我们一点也不该视疗病与治痛为快乐的事。
旧姿势的苦容易理解，新姿势的苦则不易理解；一个人有了智慧可以看穿新姿势的苦，如果没有智慧，贪必然生起，这就是为什么我们必须设法找出新姿势的苦在哪里，有什么方法呢？方法就是要了解为什么我们会改变姿势。当我们理解到，我们是因为有苦受所以改变姿势，我们还必须更进一步理解，事实上，任何姿势都是有苦的。坐会成为苦，站会成为苦，因此我们才会改变姿势；所有姿势都会变成苦，所以必须不断改变姿势，我们躺下一会儿，苦就会产生，刚开始时，我们认为躺下是快乐的，所以我们要躺下，但经历了一会儿，我们注意到它也是苦的，因此我们了解，苦这个事实是可以在任何姿势发现的。以这个方法去理解各种姿势，那么以为他们是快乐的错觉必将消失，只要我们以为任何姿势都是快乐的，错觉即生起，我们将无法消除它们。

正如前述，理解旧姿势的苦是容易的，因为苦受较明显，但是要理解新姿势是苦的就不容易。我们必须辨认出不同形态的苦，体会随时都要改变姿势或治苦的必要。能理解所有形成、身与心的本质是苦，就是智慧。

不要黏著于任何特定状态

当我们练习内观时，我们不应黏著于任何特定状态，欲了解此点，我们再次以姿势来说明。如果我们问一个正在禅修的人，他最喜欢什么姿势，他可能说他最喜欢坐、立或行，我们会进一步问他，为什么他以那种姿势禅修的时间比别种姿势长，他可能回答，他喜欢那种姿势。因此我们必须问他为什么，他可能回答喜欢某个姿势的原因是该姿势容易使他专注，心比较不会徘徊不定；有些人会说，当他们坐下时，心念徘徊得很严重，由于他们「想要」心专注而定于一境，因此必须走动。所有这些动机都是受到贪的影响。为了心念能够专注而走路是错的，如果我们有这种想法，就是有了错误的观念，以为走路是好的或有用的，走路能带来快乐及我们想要的东西，这些都是因为我们相信专注的心能够带来智慧。如果我们为了这些理由而走路是错的。因为贪欲而走路是无法同时又拥有智慧。如果我们在走路的时候黏著于专注，贪欲将生起而掩盖了走路姿势的真相；因为我们误以为走路的姿势是好的、有用的，我们会期待做那种动作。

面对诸如为什么不能先专注然后再内观的问题，我会回答，如果专注时有一个内观的对象（心与身），那么就没有问题，相反地，如果专注是出于欲望或因为你创造一个对象，那么你将无法对那个对象做内观；一个建构出来的东西不能成为内观的对象。因为直接的经验被掩盖了，我们无法在一个建构出来的东西发现真相。内观智慧必须在日常生活的现实活动中体会，不会在任何与现实的日常活动无关的、被创造出来的对象上出现。

当一个人在培养内观的时候，有时他会知道他应该要体会三特性，知道心理状态与肉体是无常、苦或无我，他会在脑中反覆出现这种念头，但却没有直接去注意当下的状态；而体认心理状态与肉体的无常则源于念念分明的实际练习。如果我们不知道这种体会如何产生，只会思考心理状态与肉体的特性，而不是当下明觉现时状态，这表示我们只是想到概念而已，而且我们相信，只要以这种方式思考，一直到内观智慧产生，就是练习内观的禅修了。然而，这是错误的认识，因为经由思考而非经验的认知并不是获取内观的方法，我们必须培养正确的因，正确的果才会产生。此后我们会亲自看到苦、无常与无我之间是如何相互关联，我们将看到任何无常的事物终究是苦与无我的，不是我们能控制的。

练习正念最重要的一点是留意当下的事物，而不要对未来期待任何事物，如此可以于任何姿势免除烦恼的生起。如果我们是为了使心平静而坐，或为了使心宁静而站，我们就不是在发展内观，贪欲不会因此消除。对平静的欲望也是黏著。无论我们留意的是什么姿势，我们必须随时小心地察觉烦恼是否生起，如此清楚地认识心理状态与肉体才是正确的练习方法。不要强迫自己坐很长的时间，或固定长的时间，如果像这样练习，是错误的方法。我们不要强迫自己。如果我们强迫自己，这些练习都与「自我」的迷惑有关，而且这种迷惑也会跟随所有姿势。企图以这种方法控制动作不会带来内观的智慧。为了要获得内观智慧，不能有任何控制欲望或时间表（如于预定的一段时间内保持某种姿势，或预约一个时间做特定活动），只要留意那些迫使你改变姿势的正确原因即可。

如果我们认真地想想，将体会到我们必须不断地改变姿势，而这件事一点也不是快乐的。当我们考虑了所有姿势而体会这个事实，就会摧毁掩蔽苦的迷惑；迷惑摧毁了，以苦为乐的错误见解随即摧毁，智慧因而生起。要体会这点必须要有正确的了解。苦是四圣谛之首，体会苦的人可以说就是看到了存在的真相，摧毁认识苦的障碍是体会真理的方法之一。

更进一步，我们要了解留意任何姿势的另一个理由，就是要认识无我的真理。当我们没有留意坐姿或卧姿，我们就不会知道是什么在坐、是什么在卧，如果不知道什么在坐、什么在卧，必定会以为是「我」在坐或卧，因此，当苦于任何姿势生起时，我们会认为是「我们」在受苦，这是因为我们仍然相信，受苦的是「我」。如果我们仍然感觉「我们」在苦或苦中有「我们」，我们就仍未消除「我」的观念。是谁在受苦呢？是肉体？或心理状态在受苦？如果检查心理状态与肉体仍看不到事情的真实面貌，表示我们仍然黏著于「自我」的迷惑。当我们留意姿势时，应小心观察是否有肉体与心理之外的东西存在，它们是否就是永恒或「自我」，这一点很重要，必须要牢记，否则我们不能消除「自我」或「我」的迷惑。
对所有肉体与心理状态保持念念分明，是注意身体姿势的基本练习。对所有看、听、嗅、尝与触保持无间的留意也是必要的，当我们经由眼睛认知一个对象时，我们必须留意到，这是看的心理状态；当我们经由耳朵认知一个对象时，我们要留意这是听的心理状态；不必去留意声音，要留意的是听觉。如果一个老师没有正确的认识，可能告诉练习者，留意声音或听觉都可以，因此，这个老师可能会建议学生，如果声音比较明显或清楚，就去留意声音，如果我们是用这种方式练习正念，就是错误的练习方法。
留意颜色或声音无法通向内观，因为我们愈是留意颜色或声音，我们只会愈专注，而不是内观。正如前述，这不是正确的练习方法，因为贪欲、错误见解与妄想会不断地确认「我」见。是听觉让我们认为是「我们」在听、在感觉等，既然贪欲与错误的见解不会在听的时候把声音当成是「我」，因此不必留意声音。贪欲、误解、幻想出现的地方，就是我们藉著正念去消灭它们的地方。因此，我们必须在听的时候留意听，我们也要知道听觉是一种心理状态，否则会误以为是「我」在听。我们必须留意听，使我们可以消除听中的「我」或「自我」。因此，有一点很重要而必须了解的是，当我们在听或看时，它只是听或看的心理状态或过程。相同地，当心念在徘徊时，我们必须留意徘徊的心理状态，不要因为想要停止徘徊的心或渴望一个宁静的心而保持正念，不要让这种观念偷偷进入修习中，我们必须让心平衡地观察徘徊的心理状态。再说一次，这种情形应该与一个人观看表演或电影的情形一样（演员就像是徘徊的心），当我们观察徘徊的心时，不要想去停止它，徘徊的心本身可以展现存在的三个特性，不要以为徘徊的心没有我们要看的三特性，也不要以为三特性只存于宁静的心中。事实上，我们在徘徊的心中较诸宁静的心更容易体会三特性，因为我们更容易在徘徊的心中看到心是如何地不易控制，一点都不是「我」，而且是苦的。

留意当下的对象

继续练习下去，我们必须注意每一个对象在知觉时的初始状态。我们已经对知觉的心理状态能够保持注意，现在我们也应该注意肉体。当我们在嗅某物时，应该留意嗅并体认这是一个肉体活动，当我们在尝东西或味道接触在舌头时，应该留意味觉及此一肉体活动；另外，我们应该了解，味觉的产生并不是出于我们的欲望。例如，当我们吃到盐时，虽然可能不喜欢咸的味道，但无法改变咸的本来特性，因此，如果我们看到咸味的本来面貌，并非出于我们的好恶，那么贪欲就不会在这个时候产生，这就是为什么活在当下是避免贪、瞠的最重要方法。「当下」的意义是∶在某一特定时刻，不受欲望影响的存在。我们必须留意每一个对象并认识其真正性质，如果有任何对象是因为我们的欲望而生起，那么烦恼即跟著生起。我们必须了解，任何经由欲望去认识的对象，并不能真正显露实相，因为它是建构出来的东西。我们如何能认识一个建构出来的东西之真实面貌呢？唯一能显露真相的东西是当下的东西，是由其本身展现的东西，而与我们的欲望无关。

我们必须了解什么是当下的对象。有时候我们可能自认为已经在留意当下的对象，而事实却不是这样。当下的对象，是在刹那间出现，就好像在水中抓鱼一样，我们看到一条鱼在水里某处游，便以为可以抓到它，要伸手去抓，但是这条鱼却溜往别的方向而失手，留意当下的对象也是如此，贪与瞠始终会把当下的对象推往他处。

当我们留意任何出现的对象本身时，这对象就是当下的对象。然而，大部分的时候，我们并不是留意当下的对象或存在。让我们举个例子，当我们留意坐的姿势，就是当下的对象，如果我们的心念转到宁静的观念，我们的目标指向宁静或舒适，此时就完全不是在留意当下坐的对象，我们并不想发现坐的姿势的真相，而是在留意著尚未出现而想要获得的宁静的心。

我们必须在所有身心活动的当下都清楚地观察它们，然后才会看到它们是如何地无我与苦。如果没有将当下的存在于当下观察到，我们将是在浪费练习的时间。但是如果我们突然地发现，我们的心念已在当下的对象上溜走，那时候我们可以再度念念分明地回到当下的对象上。如果我们了解心理状态的这些特性，将能够于正确对象保持较长的正念时间，且较有机会体会真相。

现在让我们观照「吃」。我们应该保持正念并思考吃东西的理由。经典告诉我们，我们吃食物并不是因为我们要它，不因为它是食物，而是因为它是维持身体所必要的。佛陀曾提到要维持生命的一个理由，就是要有足够力量发展通往止息所有苦与烦恼的正道。具备这种想法是必要的，否则我们将无法避免烦恼的生起。我们必须了解，我不是因为食物好吃而吃它，而是为了治苦与满足饥饿。当我们为了满足饥饿而吃东西，那么即使是不好吃的食物，也能解决饥饿；如果我们是因为食物的美味而吃它，当它不好吃时，瞠即生起，反过来说，如果它很好吃，那么贪即生起，这表示我们吃东西只会孳长烦恼；当食物好吃，贪或黏著生起，当食物不好吃，就不满意了。吃东西时没有思考这些问题，会产生更多的欲望轮回、生死轮回，这些就是苦的无尽延续。因此，当我们运用正念于吃东西时，我们必须于张开的每一口都了解吃的理由，使我们在吃的时候，只是为了解除苦而吃。当我们吃东西的时候，如果喜欢与讨厌都未生起，内观即生起了。

当我们洗澡时，也应了解这个动作是为了治苦，在我们日常的责任中，我们应该看到这些活动的理由，我们不应为了美观而穿衣服，因此我们不要选这个或那个颜色，而是为了用衣服保护身体，抵抗寒冷与昆虫如蚊蝇，这表示无论是什么动作，它们都是为了实现涅盘与灭苦，当我们有了这种彻底的了解，对无常色身的黏著会变得愈来愈弱，但是要记住，我们必须认清肉体是什么状态，心念又是如何，而且要随时保持明觉与认知。所有的存在不超过心理现象与肉体，没有身体、没有灵魂、没有女人、没有男人在坐，没有人在站、行或睡，没有人在嗅、看或听等等，没有人在了解或知道这些事情。

净化的步骤

我们觉悟到心理状态与肉体的空性后，就达到了内观智的第一个阶段，称为「名色分别智」（n^ama-r^upa-pariccheda-^n^a&na）。这个层次的内观，使我们对任何现象都能直接地认知心理与肉体的区别，我们必须了解，由「名色分别智」而认识的心理状态与肉体，与一般学习或听闻所认识的并不相同，没有经验到这种「分别智」的人，无法区别理论的知与实践的知的不同。因此，它认知的任何东西仍然留有「我」在听或看的迷惑，尽管具备了什么是心理状态或什么是肉体的理论知识，仍然还是很迷惑。例如，如果我问坐姿是心理状态或肉体，他可以回答是肉体，但是当他正在坐时，他是否体会坐是肉体，并清楚地将心理状态区别出来？这就是修习与理论的差别。事实上，要获得「名色分别智」并不容易，虽然它只是发展内观所需知识的第一阶段而已；它需要很强的正念与专注，才能在每一个时刻很清楚地区别这些。

现在我们必须继续更深入地修习，这表示我们必须对心理状态和肉体保持更深层的正念。起初，我们没有注意到心理状态与肉体是互为因果，而只是保持正念，只知道什么是心理状态与肉体，但是现在，我们对心理状态与肉体留意得愈多，会看到愈多有关它们生起的原因。例如，当听觉生起时，我们会了解声音是听觉的一个因素；当视觉出现时，会了解颜色是其因素，在这种情况下，我们也会看到那些心理状态是随声音与颜色而生起，至于身体的不同姿势与动作，我们必须随时保持警觉，我们将看到移动中的肉体是以心念为其原因，它受到意识的鼓动。是意识指示身体去站立、坐下、走动或改变姿势，不同姿势因而产生。肉体的所有这些姿势是因为有心为他们的原因而产生，而当这一种心理状态产生时，则有肉体为它的原因，因此心理状态与肉体的产生可以说是来自条件因素，这种内观知识会在我们获得「把握因缘智」（paccaya-pariggaha-^n^a&na）后发生，当我们如此保持正念时，心与肉体之间的因果关系即彰显出来。在此之前，我们即使知道存在即是心与肉体，仍然不知道心与肉体如何产生或由什么原因产生，当我们不知道其中道理，就会以为它们的存在是来自神
，正如其他宗教系统所描述的。但是当我们达到「把握因缘智」的阶段时，我们将知道它并不是由任何人所创造，而是受到因缘的制约，它们彼此之间存著因果关系，心与肉体可视为独立的因，这就像钟声是由两件东西而产生──槌与钟，如果槌没有敲钟，就不会有声音，没有人能够发出这个钟声，也没有人知道此声音来自哪里，将至何处，但是只要这两件东西存在，声音即产生；如果我们深入体验这种心与肉体的关系，那么有关心与肉体如何产生，与什么令它们产生的疑问将会消失。

在这个阶段的内观，虽然我们知道了心与肉体的因缘，仍未完全体会他们之间的分离，尚未经验心与肉体的快速过程及消逝；心理状态与肉体极快速地消逝，而内观尚未灵敏至能观察到，因此，我们必须继续不断地对心与肉体保持正念，直到看到它们的消逝。例如，当我们由坐姿变换至别种姿势时，我们将体会到坐姿的消逝；当我们由站姿而结束站姿时，将体会到站姿的消逝，并体会一个新姿势的生起，当我们体会此点，便知道站姿不是永远的，刚开始时我们会在此曙光下经验我们的姿势与感觉，当我们体会了一个姿势的消逝，将会立刻注意到另一个新姿势的生起，然而，我们只有在那个姿势停止时才体会其消逝，我们仍然要去体会肉体在那个姿势时的消逝与生起；到目前为止，我们体会坐姿的消逝，是因为坐姿已经改变为其他姿势；接下来我们要在仍然坐著时即体会坐姿的消逝，这表示当内观深化后，我们可以在坐著时即体会其消逝。这可在我们坐著时心理状态与肉体的快速流变中仍然注意其区别而发生；当持续练习后，这种快速流变的经验会变得果断而确定，有了这种阶段的内观，我们将知道即使是过去或未来的所有现象都将是同样地无常。当我们有了这知识，对未
来的特性将不再有疑问。当我们经验并体会了各种存在的生起与消逝，那么我们已获得了「遍知智」（samasane　^n^a&na）这一阶段的内观，它能让我们坚定地看到心理状态与肉体的无常，可以说这个阶段的内观知识实践了存在的三法印，因为它经验了心理状态与肉体的无常，及每一刹那的生与灭，但是它仍未经验到心理状态与肉体的快速递变的清晰界限，这种程度的知识仍不够强烈与灵敏，不足以拔除深藏在我们意识之中最基本的误解或错误观点。

如果我们持续正念的练习，内观智慧将愈来愈灵敏，我们的正念将愈来愈细腻与灵巧；我们愈能保持正念，我们愈能持续地活在当下；现在已经开启了当下的正念，心与肉体的每一状态的生起与消逝已有鲜明的区别，当我们经验心理状态的生灭的区别，我们将获得所谓「生灭随观智」（udayabbaya-^n^a&na）的内观知识，此阶段内观也包含前三阶段的实现，一个人能经验到第一阶段的内观，能理解所有的存在都只是心理状态与肉体；能经验到第二阶段的智识或内观，即经验到心理状态与肉体之生起原因；及第三阶段的内观，让一个人首度经验心理状态与肉体的生灭特性，但尚未能清楚地区隔它们。

由于体证了「生灭随观智」，毗婆舍那的道路才真正开始，此阶段的知识非常重要，这种知识令人首度经验心理状态与肉体的快速流变的区分；随著正念的增强，「生灭智」变得非常灵敏，这阶段的知识揭开刹那生死，它清楚地看到心理状态与肉体于生灭中快速递变的分隔空间，要拥有这个阶段的内观，必须具备非常敏捷的智慧，这种智慧会根除并摧毁心与肉体是永恒的假象，它将显露它们不是持久快乐的根源，它们是「无我」，这个智慧会除去许多建立在我们意识中的误解，然而，这种内观知识仍是暂时的，无法完全根除所有的错误见解，它会开始减少烦恼，特别是误以为经验是真「我」的误解。这阶段的内观知识非常强，指导老师不必向行者保证他已实证真理，他自己具足的内观知识已能够正确而肯定地判断，此刻，心中将生起很大的喜乐与光明，觉知的清晰度是以前从未经验到的，也是第一次在心中体会到真正的自由。

透过直接的经验去体会心理状态与肉体的生灭的清楚区分，与透过听闻或研读而认识是不同的，无论你听闻得多好或因研究而了解得多深，你仍未经验到真正的存在，真正的存在无法透过思考或研读而获得，如果我们思考或研读，我们只有观念上的知识，所知道的只与过去或未来有关，而当下的真正东西将被忽视；只经由思考去认识事物，是透过比较去连结过去与未来，所引用的思考并没有直接经验到当下的真实状况，因此这些思考无法消除任何潜伏的烦恼，只能透过经由正确的因与正确的练习的内观智慧，以及清除所有「我」的肉体邪见，然后疑惑、不确定或任何怀疑才能消失。例如，有关于心与色如何生起的所有疑问都消除了。我们清楚地看到自己的因缘，并一步一步地经验到真相，直到所有的不安消失。

达到「生灭随观智」的内观的获得，已是一个非常高的修习境界，禅修者对每一刻的经验将拥有一个崭新的认识。

如果修行者黏著于「生灭随观智」，或是在此之前已练过禅定，而且定力非常强，那么这个阶段可能出现内观的染著，所谓「内观染著」指的是修行者已获得这个阶段的内观知识，并经历了微细的染著，这些内观染著是一种非常微细的染著形式，共有十种，他们可能是因为黏著于禅定的力量而造成，他们会障碍通往更高阶段内观的进展，例如，心可能充满快乐与狂喜，微细的黏著产生了，而对深化内观的感觉与喜好将因而减少、消失，如此我们看到内观染著是如何成为内观发展的障碍，当修行者的智慧不够灵敏，无法了解并放弃此种通常是极诱人的染著，他就无法再往前进步，因此对于会阻碍引导我们何者是正确，何者是错误路径的这一点，我们必须有精确的了解，否则，会发生错误的结果，而我们仍不知道我们的修行错在哪里。这是很困难的，因为感受是巧妙、悦人而且快乐的，这些会误导我们，让我们认为已经开悟，已经达到涅盘了，缺乏正见的话，我们完全不知道在内观练习中所获得的成就是否正确。

当我们了解到通往更深层内观是需要放下各种心理状态的黏著时，正见才会生起。高度的喜乐、喜悦、定境，甚至正念都可能成为我们黏著的对象，当我们了解内观只有在清晰而不执著的正念中才可能持续发展时，内观的染著才能消逝，现在，当「生灭随观智」自内观染著中厘清时，我们可以在明明白白而没有任何欲望的干扰下，看透心念与肉体的生灭。

然后，所谓的「行道智见清净」（种姓智gotrabhu-^n^a&na）的内观阶段才会生起，此种内观了解到通往涅盘的道路，必须放下对心或肉体最微细的黏著。

现在，更高阶段的内观知识从此开始快速地发展，对正在进行的当下过程的正念更敏锐。「生灭随观智」的正念显露愈多实相，智慧发展得愈多；当出现此种现象时，下个阶段的内观，也就是「现象分解」内观的出现。修行者的注意力愈是集中在当前的对象，他愈能经验到心与肉体的消逝，此种眼前所见全都分解的现象令人震慑，但是当他仍停在当前对象时，那也只不过是集中注意的心与肉体的消逝，此种知识经验称为「坏随观智」（bha&nga膸nupssana-^n^a&na），意思是说任何事物都是危险、恐怖、没有实体且不悦人的，因此他会感觉厌倦，渐渐地能自心色的黏著中出离，此种出离的感觉称为「厌离随观智」（nibbida-^n^a&na），正如修行内观的结果，这时对心与肉体的任何状态的黏著会愈来愈弱。

最后，修行者会到达最清晰与离系的阶段，即「行舍智」（sa&nkha膸rupekha-^n^a&na），也就是于任何状态皆保持宁静的知识。这个阶段的心不再有任何黏著，能清楚而没有任何染著地看待任何经验，修行者可以体会涅盘，并且永远根除邪见与其他染著。

这是对内观之道较高阶段的一个非常概略性的描述，我愿藉著再度强调「生灭随观智」的重要性来总结这段描述。这是一个非常重要的阶段。如果你修习并获得这个知识，那么由此阶段之上的更高知识将因此而持续进展，直到最后终于了解心与肉体的最完整的特性，并经验到这个过程的止息──涅盘。

现在，我要再深入讨论一件事情；你可能听过许多次下面的说法，说是为了获得涅盘，并不需要特别练习或遵循特定的步骤，没有任何法则或方法；既然有许多方法最后都是通向涅盘，因此我们做的任何方法都是对的。根据证据与理由，这种信仰是绝对不正确的。根据所有证据，所有佛教徒也都知道，佛陀本身证实只有一条道路可以通往涅盘，那个方法就是四念处，只有佛陀告诉我们这个方法。如果人们想要依他们自己的方法练习禅修，那么每个人都会发明他自己的规则，每个人都说他的方法最后到达涅盘，这种误解是合理的吗？有可能吗？果真如此，那么佛陀就不是一个诚实的人了。如果每一个人可以没有正念而到达涅盘，那么就不需要佛陀教这种修行法门了。我们知道佛陀时代有许多宗教派别与禅修方法，那时候甚至有超能力的修行，例如∶空中飞行、水上行走、穿越山丘，所有这些超能力的修行都相当常见，然而，并没有人教导真正通往涅盘的路。因此，如果任何人仍有此种错误观念，以为有许多通往涅盘的路，那么请他仔细想想这件事吧！不要忘记了，我们是因为佛陀为我们显示获得涅盘的心灵发展方法才尊敬他，这个方法主要就是四念处，那是世界上任何其他的老师所不曾教导的，那就是为什么佛教徒尊崇佛陀为世界最伟大的人，并对其智慧、清净
与慈悲表示尊敬，如果我们没有依据四念处培养内观能力，我们就不能真正了解佛教；即使在目前，还是很少人对四念处有正确的了解，事实上，虽然这个系统完全合理，然欲立刻或快速地建立正确的认识仍非易事，我们应该深入研究，并试著以合理的方式了解，然后透过练习验证其正确性，我们必须随时透过练习测试佛教，并且自证实相。

总结

让我为毗婆舍那的修行总结一些方向∶

一、开始学习毗婆舍那的时候，应该要发展出一个彻底的认识，就是任何存在都只是由心理状态与肉体构成。

二、与你有关的肉体与心理状态只发生在你自己身上，因此你必须在每一刹那的当下，都能对它们保持正念，以便清楚地看到它们的本质。

三、禅修的对象必须是不间断的心理状态或肉体，而且始终是当下的状况；如果感受出现，检查它，如果追踪中断，不要忧虑，只要重新再来，继续检查肉体与心理状态。

四、在练习过程中，禅修者必须注意，不要生起欲念，想去看到某些事或想去发展某些内观，你只要注视肉体与心理状态即可。

五、不要同时检查肉体与心理状态，而应分别检查他们，而且永远是当下。

六、守住站、坐、行与卧这四种主要姿势，避免次要的动作。

七、如果有必要改变姿势，在改变之前要确定知道移动的理由或原因。

八、使用平常姿态与姿势，并检查每一个平常的姿势与心理状态。

九、试著自然一些，不要故意很慢地走路与移动来加速内观，这种欲望会障碍内观。

十、当练习时，不要做任何不必要的事情。
──不要说没有必要的话。
──除非必要，不要改变姿势。
──除非必要，不要吃东西。

十一、在做任何事情之前，必须了解动作的必要理由，并看到如何被痛苦强迫去做。

十二、舍弃「禅修是一件特别的事情」的这种感觉，它并不是去追求某种事情的时刻，而只是检查我们动作的原因与心及肉体的特性。

十三、不要想透过禅修，求得诸如喜乐或宁静等的心理状态。

十四、毗婆舍那禅修者必须像一出戏剧中的观众，不要想去指挥剧情，只是留意地看著肉体与心理状态进入意识的流动，此种平衡的刹那将导向智慧。

（译按∶读者若想多了解阿姜念的教法，请参考阿姜念著，凡拉达摩译∶《身念处禅观修法》）

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Book Recommendation - A mindful-based stress reduction workbook

2011-06-03T20:53:00.000-07:00

A wonderful book to relieve your stress.

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Enjoy!

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2011-04-28T17:06:00.000-07:00

laughinggas said...

Hello, Would you help me answer this one? What is the major product after dehydration of 2,2 dimethyl hexanol?
The answer is 1,2 dimethyl-hexa-ene,
but I don't know how it happen?

thank you very much

Ans:

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A MCAT/SAT physics tip

2011-04-18T22:39:00.000-07:00

机械能守恒。1/2 mVt^2 = 1/2 m Vo^2 +mgh

How to remember the following crazy physics translational motion equation?
V² = V₀² + 2aΔx

The change of kinetic energy equals to the work (FΔx) applied to the object

(1/2)mV²= (1/2)mV₀²+ FΔx

P.S.

Δx = V₀t + (1/2) at²

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生物化学答疑库（很全面共133道题）

2011-04-17T12:18:00.000-07:00

生物化学答疑库（很全面共133道题）_基础生化_中生网

1.糖类化合物有哪些生物学功能？
[答]（1）作为生物体的结构成分：植物的根、茎、叶含有大量的纤维素、半纤维素和果胶等，这些物质是构成植物细胞壁的主要成分。肽聚糖属于杂多糖，是构成细菌细胞壁的结构多糖。（2）作为生物体内的主要能源物质：糖在生物体内分解时通过氧化磷酸化放出能量，供生命活动需要。生物体内作为能源贮存的糖类有淀粉、糖原等。（3）在生物体内转变为其他物质：有些糖是重要的代谢中间物，糖类物质通过这些中间代谢物合成其他生物分子例如氨基酸、核苷酸等。（4）作为细胞识别的信息分子:：糖蛋白是一类生物体内分布极广的复合糖，其中的糖链在分子或细胞的特异性识别过程中可能起着信息分子的作用。与免疫保护、发育、形态发生、衰老、器官移植等均与糖蛋白有关。

2.葡萄糖溶液为什么有变旋现象？
[答] D-吡喃葡萄糖在乙醇溶液或吡啶溶液中可以形成结晶，得到两种比旋光度不同的D-葡萄糖，前者的比旋光度为+113^o，后者的比旋光度为+19^o。如果把这两种葡萄糖结晶分别溶解在水中，并放在旋光仪中观察，前者的比旋光度由+113^o降至+52^o，后者由+19^o升到+52^o，随后稳定不变。葡萄糖溶液发生比旋光度改变的主要原因是葡萄糖具有不同的环状结构，当葡萄糖由开链结构变为环状结构时，C1原子同时变成不对称碳原子，同时产生了两个新的旋光异构体。一个叫α-D-吡喃葡萄糖，另外一个叫β-D-吡喃葡萄糖，这两种物质互为异头物，在溶液中可以通过开链式结构发生相互转化，达到最后的平衡，其比旋光度为+52 ^o。
3.什么是糖蛋白？有何生物学功能？
[答] 糖蛋白是广泛存在与动物、植物和微生物中的一类含糖基（或糖衍生物）的蛋白质，糖基与蛋白质的氨基酸以共价键结合。糖蛋白中的寡糖链大小不一，小的仅为1个单糖，复杂的有10~20个单糖分子或其衍生物组成的。有的寡糖链是直链，有的为支链，组成寡糖链的单糖主要有葡萄糖、甘露糖、木糖、岩藻糖、N-乙酰-氨基葡萄糖、N-乙酰-氨基半乳糖、葡萄醛酸和艾杜糖醛酸等。糖蛋白的主要生物学功能：（1）激素功能：一些糖蛋白属于激素，例如促滤泡激素、促黄体激素、绒毛膜促性腺激素等均属于糖蛋白。（2）保护机体：细胞膜中的免疫球蛋白、补体也是糖蛋白。（3）凝血和纤溶作用：参与血液凝固和纤溶的蛋白质例如凝血酶原、纤溶酶原均为糖蛋白。（4）具有运输功能：例如转运甲状腺素的结合蛋白、运输铜元素的铜蓝蛋白、运输铁元素的转铁蛋白等均属于糖蛋白。（5）决定血液的类型：决定血型的凝集原A,B,O以糖蛋白和糖脂的形式存在。（6）与酶的活性有关：糖蛋白在酶的新生肽链折叠、转运和保护等方面普遍起作用。（7）一些凝集素属于糖蛋白。

4.纤维素和糖原都是由D-葡萄糖经1→4连接的大分子，相对分子质量相当，是什么结构特点造成它们的物理性质和生物学功能上有很大的差异？
[答]糖原结构与支链淀粉的结构很相似，糖原的分支较多，平均每8~12个残基发生一次分支。糖元高度的分支结构一则可以增加分子的溶解度，二则将有更多的非还原端同时接受到降解酶的作用，加速聚合物转化为单体，有利于及时动用葡萄糖库以供生物体代谢的急需。
纤维素是线性葡聚糖，残基间通过β（1→4）糖苷键连接的纤为二糖单位。纤维素链中的每一个残基相对前一个翻转1800，使链采取完全伸展的构象。相邻、平行的伸展链在残基环面的水平向通过链内和链间的氢键网形成片层结构。若干条链聚集成周期性晶格的分子束，称微晶或胶束。多个胶束形成微纤维，在植物细胞中，纤维素包埋在果胶、半纤维素、木质素、伸展蛋白等组成的基质中。纤维素与基质粘合在一起增强了细胞壁的抗张强度和机械性能，以适应植物抵抗高渗透压和支撑高大植株的需要。

5.天然脂肪酸在结构上有哪些共同特点？
[答] 来自动物的天然脂肪酸碳骨架为线性，双键数目一般为1~4个，少数为6个。细菌所含的脂肪酸大多数是饱和的，少数为单烯酸，多于一个得极少，有些含有分支的甲基。天然脂肪酸的碳骨架原子数目几乎都是偶数，奇数碳原子的脂肪酸在陆地生物中极少，但在海洋生物有相当的数量。天然脂肪酸碳骨架长度为4~36个，多数为12~24个，最常见的为16、18碳，例如软脂酸、硬脂酸和油酸，低于14碳的主要存在于乳脂中。大多数单不饱和脂肪酸中的双键位置在C9和C10之间。在多不饱和脂肪酸中通常一个双键也为于△9，其余双键位于△9和烃链的末端甲基之间，双键一般为顺式。

6.为什么多不饱和脂肪酸容易受到脂质过氧化？
[答] 多不饱和脂肪酸分子中与两个双键相连接的亚甲基（-CH2-）上的氢比较活泼，这是因为双键减弱了与之连接的碳原子与氢原子之间的C-H键，使氢很容易被抽去。例如羟基自由基从-CH2-抽去一个氢原子后，在该碳原子上留下一个未成对电子，形成脂质自由基L?。后者经分子重排、双键共轭化，形成较稳定的共轭二烯衍生物。在有氧的条件下，共轭二烯自由基与氧分子结合生成脂质过氧自由基LOO?。LOO?能从附近的另外一个脂质分子LH抽氢生成新的脂质自由基L?。这样就形成了链式反应，导致多不饱和脂肪酸发生脂质过氧化

7.人和动物体内胆固醇可能转变为哪些具有重要生理意义的类固醇物质？
[答] 激素类：雄激素、雌激素、孕酮、糖皮质激素和盐皮质激素。非激素类：维生素D、胆汁酸（包括胆酸、鹅胆酸和脱氧胆酸）。牛磺胆酸和甘氨胆酸。

8.判断氨基酸所带的净电荷，用pI-pH比pH-pI更好，为什么？
[答] 当一种氨基酸的净电荷用q=pI-pH表达时，若q为正值，则该氨基酸带正电荷；若q为负值，则该氨基酸带负电荷。q值的正与负和该氨基酸所带电荷的种类是一致的。如果采用q=pH-pI来表达，则会出现相反的结果，即q为负值时，氨基酸带正电荷；q为正值时，氨基酸带负电荷。因此，用pI-pH更好。

9.甘氨酸是乙酸甲基上的氢被氨基取代生成的，为什么乙酸羧基的pKa是4.75，而甘氨酸羧基的pKa是2.34？
[答] 当甘氨酸溶液的pH低于6.0时，氨基以带正电荷的形式存在，带正电荷的氨基通过静电相互作用（诱导效应）使羧基更容易失去质子，成为更强的酸。

10.（1）Ala，Ser，Phe，Leu，Arg，Asp，Lys 和His的混合液中pH3.9进行纸电泳，哪些向阳极移动？哪些向阴极移动？（2）为什么带相同净电荷的氨基酸如Gly和Leu在纸电泳时迁移率会稍有差别？
[答]（1）Ala ,Ser,Phe和Leu的pI在6左右。在PH3.9时，都带净正电荷，所以向阴极移动，但彼此不能分开；His和Arg的pI分别是7.6和10.8，在pH3.9时，它们亦带净正电荷向阴极移动。由于它们带的正电荷多，所以能和其他向阴极移动的氨基酸分开；Asp的pI是3.0,在PH3.9时，它带负电荷，向阳极移动。（2）电泳时若氨基酸带有相同电荷，则相对分子质量大的移动速度较慢。因为相对分子质量大的氨基酸，电荷与质量的比小，导致单位质量受到的作用力小，所以移动慢。

11.（1）由20种氨基酸组成的20肽，若每种氨基酸残基在肽链中只能出现1次，有可能形成多少种不同的肽链？（2）由20种氨基酸组成的20肽，若在肽链的任一位置20种氨基酸出现的概率相等，有可能形成多少种不同的肽链？
[答]（1）可能的种类数为20！≈ ；（2）可能的种类数为2020≈ 。

12.在大多数氨基酸中， -COOH的pKa都接近2.0， -NH 的pKa都接近9.0。但是，在肽链中， -COOH的pKa为3.8，而 -NH3＋的pKa值为7.8。你能解释这种差别吗？
[答] 在游离的氨基酸中，带正电荷的使带负电荷的-COO-稳定，使羧基成为一种更强的酸。相反地，带负电荷的羧酸使稳定，使它成为一种更弱的酸，因而使它的pKa升高。当肽形成时，游离的 -氨基和 -羧基分开的距离增大，相互影响降低，从而使它们的pKa值发生变化。

13. 螺旋的稳定性不仅取决于肽链内部的氢键，而且还与氨基酸侧链的性质相关。室温下，在溶液中下列多聚氨基酸哪些能形成螺旋？哪些能形成其他有规则的结构？哪些能形成无规则的结构？并说明其理由。（1）多聚亮氨酸pH7.0；（2）多聚异亮氨酸pH7.0；(3) 多聚精氨酸pH7.0；(4) 多聚精氨酸pH13.0；（5）多聚谷氨酸pH1.5； (6) 多聚苏氨酸pH7.0； (7) 多聚羟脯氨酸pH7.0。
[答]（1）多聚亮氨酸的R基团不带电荷，适合于形成 -螺旋。（2）异亮氨酸的 -碳位上有分支，所以形成无规则结构。（3）在pH7.0时，所有精氨酸的R基团带正电荷，由于静电斥力，使氢键不能形成，所以形成无规则结构。（4）在pH13.0时，精氨酸的R基团不带电荷，并且 -碳位上没有分支，所以形成 -螺旋。（5）在pH1.5时，谷氨酸的R基团不带电荷，并且 -碳位上没有分支，所以形成 -螺旋。（6）因为苏氨酸 -碳位上有分支，所以不能形成 -螺旋。（7）脯氨酸和羟脯氨酸折叠成脯氨酸螺旋，这是一种不同于 -螺旋的有规则结构。

14.球蛋白的相对分子质量增加时，亲水残基和疏水残基的相对比例会发生什么变化？
[答] 随着蛋白质相对分子质量（Mr）的增加，表面积与体积的比率也就是亲水残基与疏水残基的比率必定减少。为了解释这一点，假设这些蛋白质是半径为r的球状蛋白质，由于蛋白质Mr的增加，表面积随r2增加而增加，体积随r3的增加而增加，体积的增加比表面积的增加更快，所以表面积与体积的比率减少，因此亲水残基与疏水残基的比率也就减少。

15.血红蛋白亚基和亚基的空间结构均与肌红蛋白相似，但肌红蛋白中的不少亲水残基在血红蛋白中被疏水残基取代了，这种现象能说明什么问题。
[答] 肌红蛋白以单体的形式存在，血红蛋白以四聚体的形式存在，血红蛋白分子中有更多的亲水残基，说明疏水作用对于亚基之间的结合有重要意义。

16.简述蛋白质溶液的稳定因素，和实验室沉淀蛋白质的常用方法。
[答] 维持蛋白质溶液稳定的因素有两个：（1）水化膜：蛋白质颗粒表面大多为亲水基团，可吸引水分子，使颗粒表面形成一层水化膜，从而阻断蛋白质颗粒的相互聚集，防止溶液中蛋白质的沉淀析出。（2）同种电荷：在pH≠pI的溶液中，蛋白质带有同种电荷。若pH＞pI，蛋白质带负电荷；若pH

17.（1）除共价键外，维持蛋白质结构的主要非共价键有哪几种？（2）有人说蛋白质组学比基因组学研究更具挑战性，请从蛋白质分子和DNA分子的复杂性和研究难度来说明这一观点。
[答]（1）除共价键外，维持蛋白质结构的主要非共价键有：范德华力（范德华相互作用）、疏水作用、盐键、氢键。（2）DNA是由4种元件构成的大分子，蛋白质是由20多种元件构成的大分子，显然，蛋白质的分子结构更具复杂性，DNA的双螺旋结构有一定的刚性，其空间结构相对简单，蛋白质作为单链分子，可以形成各种复杂的空间结构，由于结构的复杂性，蛋白质的功能广泛而复杂，且结构和功能受到复杂的调控，DNA的功能则相对简单。综合而论，蛋白的研究更具复杂性和挑战性。

18.简要叙述蛋白质形成寡聚体的生物学意义。
[答]（1）能提高蛋白质的稳定性。亚基结合可以减少蛋白质的表面积/体积比，使蛋白质的稳定性增高。（2）提高遗传物质的经济性和有效性。编码一个能装配成同聚体的单位所需的基因长度比编码一个与同聚体相同相对分子质量的超长肽链所需的基因长度要小得多（如烟草花叶病毒的外壳有2130多个亚基）。（3）形成功能部位。不少寡聚蛋白的单体相互聚集可以形成新的功能部位。（4）形成协同效应。寡聚蛋白与配体相互作用时，有可能形成类似血红蛋白或别构酶那样的协同效应，使其功能更加完善。有些寡聚蛋白的不同亚基可以执行不同的功能，如一些酶的亚基可分为催化亚基和调节亚基。

19.胎儿血红蛋白（Hb F）在相当于成年人血红蛋白（Hb A）链143残基位置含有Ser,而成年人链的这个位置是具阳离子的His残基。残基143面向亚基之间的中央空隙。（1）为什么2，3-二磷酸甘油酸（2，3-BPG）同脱氧Hb A的结合比同脱氧Hb F更牢固？（2）Hb F对2，3-BPG低亲和力如何影响到Hb F对氧的亲和力？这种差别对于氧从母体血液向胎儿血液的运输有何意义。
[答]（1）由于2，3-BPG是同脱氧Hb A中心空隙带正电荷的侧链结合，而脱氧Hb F缺少带正电荷的侧链（链143位的His残基），因此2，3-BPG是同脱氧Hb A的结合比同脱氧Hb F的结合更紧。（2）2，3-BPG稳定血红蛋白的脱氧形式，降低血红蛋白的氧饱和度。由于Hb F同 2，3-BPG亲和力比Hb A低，HbF受血液中2，3-BPG影响小，因此Hb F在任何氧分压下对氧的亲和力都比Hb A大，（3）亲和力的这种差别允许氧从母亲血向胎儿有效转移。

20.蛋白质变性后，其性质有哪些变化？
[答] 蛋白质变性后，氢键等次级键被破坏，蛋白质分子就从原来有秩序卷曲的紧密结构变为无秩序的松散伸展状结构。即二、三级以上的高级结构发发生改变或破坏，但一级结构没有破坏。变性后，蛋白质的溶解度降低，是由于高级结构受到破坏，使分子表面结构发生变化，亲水基团相对减少，容易引起分子间相互碰撞发生聚集沉淀，蛋白质的生物学功能丧失，由于一些化学键的外露，使蛋白质的分解更加容易。

21.为什么大多数球状蛋白质在溶液中具有下列性质。（1）在低pH值时沉淀。（2）当离子强度从零逐渐增加时，其溶解度开始增加，然后下降，最后出现沉淀。（3）在一定的离子强度下，达到等电点pH值时，表现出最小的溶解度。（4）加热时沉淀。（5）加入一种可和水混溶的非极性溶剂减小其介质的介电常数，导致溶解度的减小。（6）如果加入一种非极性强的溶剂。使介电常数大大地下降会导致变性。
[答]（1）在低pH值时，羧基质子化，蛋白质分子带有大量的净正电荷，分子内正电荷相斥使许多蛋白质变性，蛋白质分子内部疏水基团因此而向外暴露，使蛋白质溶解度降低，因而产生沉淀。（2）加入少量盐时，对稳定带电基团有利，增加了蛋白质的溶解度。但是随着盐离子浓度的增加，盐离子夺取了与蛋白质结合的水分子，降低了蛋白质的水合程度。使蛋白质水化层破坏，从而使蛋白质沉淀。（3）在等电点时，蛋白质分子之间的静电斥力最小，所以其溶解度最小。（4）加热会使蛋白质变性，蛋白质内部的疏水基团被暴露，溶解度降低，从而引起蛋白质沉淀。（5）非极性溶剂减小了表面极性基团的溶剂化作用，使蛋白质分子与水之间的氢键减少，促使蛋白质分子之间形成氢键，蛋白质的溶解度因此而降低。（6）介电常数的下降对暴露在溶剂中的非极性基团有稳定作用，促使蛋白质肽链的展开而导致变性。

22.凝胶过滤和SDS-PAGE均是利用凝胶，按照分子大小分离蛋白质的，为什么凝胶过滤时，蛋白质分子越小，洗脱速度越慢，而在SDS-PAGE中，蛋白质分子越小，迁移速度越快？
[答] 凝胶过滤时，凝胶颗粒排阻Mr较大的蛋白质，仅允许Mr较小的蛋白质进入颗粒内部，所以Mr较大的蛋白质只能在凝胶颗粒之间的空隙中通过，可以用较小体积的洗脱液从层析柱中洗脱出来。而Mr小的蛋白质必须用较大体积的洗脱液才能从层析柱中洗脱出来。SDS- PAGE分离蛋白质时，所有的蛋白质均要从凝胶的网孔中穿过，蛋白质的相对分子质量越小，受到的阻力也越小，移动速度就越快。

23.一种蛋白质的混合物在pH6的DEAE-纤维素柱中被分离，用pH6稀盐缓冲液可以洗脱C，用pH6的高盐缓冲液，B和A依次被洗脱，用凝胶过滤测定得A的Mr 是240000，B的Mr是120000，C的Mr是60000。但SDS-PAGE只发现一条带。请分析实验结果。
[答] DEAE-纤维素柱层析的结果说明，在pH6的条件下，A带有较多的负电荷，B次之，C带负电荷最少。凝胶过滤法测出A的Mr是C的4倍，B的Mr是C的2倍，但SDS-PAGE只发现一条带。由于SDS-PAGE测定的亚基的Mr，凝胶过滤法可以测定寡聚体的Mr，可以推断C是单体，B是以C为亚基的二聚体，A是以C 为亚基的4聚体，由于C在pH6时带负电荷，随着亚基数的增加，带负电荷的量也会增加，这与DEAE-纤维素层析的结果也是一致的。

24.简述酶与一般化学催化剂的共性及其特性？
[答]（1）共性：用量少而催化效率高；仅改变化学反应的速度，不改变化学反应的平衡点，酶本身在化学反应前后也不改变；可降低化学反应的活化能。（2）特性：酶作为生物催化剂的特点是催化效率更高，具有高度的专一性，容易失活，活力受条件的调节控制，全酶的活力与辅助因子有关。

25.Vmax与米氏常数可以通过作图法求得，试比较v-[S]图，双倒数图，v-v/[S]作图，[S]/v-[S]作图及直接线性作图法求Vmax和Km的优缺点？
[答]（1）v-[S]图是直角双曲线，可以通过其渐近线求Vmax，v=1/2Vmax时对应的[S]为Km；优点是比较直观，缺点是实际上测定时不容易达到Vmax，所以测不准。（2）1/v-1/[S]图是一条直线，它与纵轴的截距为1/Vmax，与横轴的截距为-1/Km，优点是使用方便，Vmax和Km都较容易求，缺点是实验得到的点一般集中在直线的左端，作图时测定值稍有偏差，直线斜率就会有较大的偏差，Km就测不准。（3）v-v/[S]图也是一条直线，它与纵轴的截距为Vmax，与横轴的截距为Vmax/Km，斜率为-Km，优点是求Km比较方便，缺点是作图前计算较繁。（4）[S]/v-[S]图也是一条直线，它与纵轴的截距为Km/Vmax，与横轴的截距为-Km，优缺点与v-v/[S]图相似。（5）直接线性作图法是一组交于一点的直线，交点的横坐标为Km，纵坐标为Vmax，是求Vmax和Km的最好的一种方法，不需计算，作图方便，缺点是实验测定值往往不会全部相交于一点，会给数据取舍造成一定的困难。
据v-[S]的米氏曲线，当底物浓度远远低于Km值时，酶不能被底物饱和，从酶的利用角度而言，很不经济；当底物浓度远远高于Km值时，酶趋于被饱和，随底物浓度改变，反应速度变化不大，不利于反应速度的调节；当底物浓度在Km值附近时，反应速度对底物浓度的变化较为敏感，有利于反应速度的调节。

26.在很多酶的活性中心均有His残基参与，为什么？
[答] 酶蛋白分子中组氨酸的侧链咪唑基pK值为6.0~7.0，在生理条件下，一部分解离，可以作为质子供体，一部分不解离，可以作为质子受体，既是酸，又是碱，可以作为广义酸碱共同催化反应，因此常参与构成酶的活性中心。

27.试比较酶的竞争性抑制作用与非竞争性抑制作用的异同。
[答] 竞争性抑制是指抑制剂I和底物S对游离酶E的结合有竞争作用，互相排斥，已结合底物的ES复合体，不能再结合I；同样已结合抑制剂的EI复合体，不能再结合S。多数竞争性抑制在化学结构上与底物S相似，能与底物S竞争与酶分子活性中心的结合，因此，抑制作用大小取决于抑制剂与底物的浓度比，加大底物浓度，可使抑制作用减弱甚至消除。竞争性抑制作用的双倒数曲线与无抑制剂的曲线相交于纵坐标I/Vmax处，但横坐标的截距，因竞争性抑制存在而变小，说明该抑制作用，并不影响酶促反应的最大速度Vmax，而使Km值变大。非竞争性抑制是指抑制剂I和底物S与酶E的结合互不影响，抑制剂I可以和酶E结合生成EI，也可以和ES复合物结合生成ESI。底物S和酶E结合成ES后，仍可与I结合生成ESI，但一旦形成ESI复合物，再不能释放酶E和形成产物P。其特点是：I和S在结构上一般无相似之处，I常与酶分子活性部位以外的化学基团结合，这种结合并不影响底物和酶的结合，增加底物浓度并不能减少I对酶的抑制程度。非竞争性抑制剂的双倒数曲线与无抑制剂的曲线相交于横坐标- 1/Km处，但纵坐标的截距，因竞争性抑制存在变大，说明该抑制作用，不影响酶促反应的Km值，而使Vmax值变小。

28.阐述酶活性部位的概念。可使用哪些主要方法研究酶的活性中心？
[答] 酶的活性中心往往是若干个在一级结构上相距很远，但在空间结构上彼此靠近的氨基酸残基集中在一起形成具有一定空间结构的区域，该区域与底物相结合并将底物转化为产物，对于结合酶来说，辅酶或辅基往往是活性中心的组成成分。酶的活力中心通常包括两部分：与底物结合的部位称为结合中心，决定酶的专一性；促进底物发生化学变化的部位称为催化中心，它决定酶所催化反应的性质以及催化的效率。有些酶的结合中心与催化中心是同一部分。对ES和EI的X-射线晶体分析、NMR分析、对特定基团的化学修饰、使用特异性的抑制剂和对酶作用的动力学研究等方法可用于研究酶的活性中心。

29.影响酶反应效率的因素有哪些?它们是如何起作用的？
[答] 影响酶催化效率的有关因素包括：（1）底物和酶的邻近效应与定向效应，邻近效应是指酶与底物结合形成中间复合物后，使底物和底物（如双分子反应）之间，酶的催化基团与底物之间结合于同一分子而使有效浓度得以极大的升高，从而使反应速率大大增加的一种效应；定向效应是指反应物的反应基团之间和酶的催化基团与底物的反应基团之间的正确取位产生的效应。（2）底物的形变和诱导契合（张力作用），当酶遇到其专一性底物时，酶中某些基团或离子可以使底物分子内敏感键中的某些基团的电子云密度增高或降低，产生“电子张力”，使敏感键的一端更加敏感，底物分子发生形变，底物比较接近它的过渡态，降低了反应活化能，使反应易于发生。（3）酸碱催化，酸碱催化是通过瞬时的向反应物提供质子或从反应物接受质子以稳定过渡态，加速反应的一类催化机制。（4）共价催化，在催化时，亲核催化剂或亲电子催化剂能分别放出电子或接受电子并作用于底物的缺电子中心或负电中心，迅速形成不稳定的共价中间复合物，降低反应活化能，使反应加速。（5）微环境的作用：酶的活性部位形成的微环境通常是疏水的，由于介电常数较低，可以加强有关基团之间的静电相互作用，加快酶促反映的速度。在同一个酶促反应中，通常会有上述的3个左右的因素同时起作用，称作多元催化。

30.辅基和辅酶在催化反应中起什么作用？它们有何不同？
[答] 辅酶和辅基的主要作用是在反应中传递电子、质子或一些基团，辅酶与酶蛋白结合较松，可以用透析或超滤方法除去；辅基与酶蛋白结合紧密，不能用透析或超滤方法除去，辅酶和辅基的差别仅仅是它们与酶蛋白结合的牢固程度不同，无严格的界限。

31.哪些因素影响酶的活性？酶宜如何保存？
[答] 底物浓度、酶含量、温度、pH、产物等均影响酶的活性，此外称为激活剂或抑制剂的某些无机或有机化学物质也会强烈影响酶的活性。天然酶在其自然环境中（细胞或组织中）是受到细胞调控的。细胞对酶的活性的控制主要是通过代谢反馈、可逆的共价修饰、细胞区室化（不同的区室pH、底物浓度等不同，可以避免产物的积累）和酶原激活等控制。制备酶制剂时，要尽量避免高温、极端pH、抑制剂等的影响，酶制剂应尽可能制成固体，并在低温下保存。无法制成固体的酶，可在液态低温保存，但要注意某些液态酶在冰冻时会失去活性。

32.某酶的化学修饰实验表明，Glu和Lys残基是这个酶活性所必需的两个残基。根据pH对酶活性影响研究揭示，该酶的最大催化活性的pH近中性。请你说明这个酶的活性部位的Glu和Lys残基在酶促反应中的作用，并予以解释。
[答] 谷氨酸的?-羧基的pKa值约为4.0，在近中性条件下，该基团去质子化，在酶促反应中起着碱催化剂的作用。赖氨酸的?-氨基的pKa值约为10.0，在近中性条件下，它被质子化，在酶促反应中起着酸催化剂的作用。

33.某物质能可逆抑制琥珀酸脱氢酶的活性，但不知道该抑制剂属何种抑制剂。你将如何证实该物质是什么类型抑制剂。
[答]（1）测定不同底物浓度下的酶促反应速度；（2）分别在几种不同抑制剂浓度存在下测定底物浓度对酶促反应速度的影响；（3）在测定相应反应速度后，以1/v对1/[S]作图（双倒数图）；（4）从坐标图上量取-1/Km和1/Vmax的距离，即可求出Km和Vmax；（5）比较无抑制剂和有抑制剂存在下的Km和Vmax。在抑制剂存在下，如果Km增大，Vmax不变，表明该抑制剂是竞争性抑制剂；如果Km不变，Vmax降低，表明该抑制剂是非竞争性抑制剂；如果Km和Vmax都降低且Vmax/Km保持不变，表明该抑制剂是反竞争性抑制剂。

34.胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶同属丝氨酸蛋白酶类，具有相同的电荷转接系统，当胰蛋白酶102位的Asp突变为Ala时将对该酶（1）与底物的结合和（2）对底物的催化有什么影响？
[答]（1）对底物的结合无显著影响；（2）对底物的催化活性丧失。

35.当抑制剂能选择性地和不可逆地与酶的活性部位的残基结合，从而能帮助鉴别酶时，这类抑制剂就可以称为亲和标记试剂。已知TPCK是胰凝乳蛋白酶的亲和标记试剂，它通过使蛋白质His烷基化而使其失活。（1）为胰蛋白酶设计一个类似TPCK的亲和标记试剂还可以用于什么蛋白质？
[答] 首先分析TPCK作为胰凝乳蛋白酶的亲和标记试剂具有什么特征结构。一般来说，亲和标记试剂有两个特点：①亲和标记试剂与底物非常类似，但缺乏可以被酶作用的位点，因而能选择性地与酶的活性部位结合，却不被酶作用，TPCK的结构中这一部分是其对甲苯磺酰-苯丙氨甲基酮部分；②亲和标记试剂有活泼的化学基团，可以与靶酶的活性部位中的某个残基反应，形成稳定的共价键。TPCK的反应基团是-CH2-Cl。其次分析胰蛋白酶与胰凝乳蛋白酶有什么相似之处。已知胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶均催化肽键的裂解反应，其结构和作用机制很相似，它们的活性部位都位于酶分子表面凹陷的口袋中，都有由His、Asp和Ser形成的催化三联体，只是专一性明显不同。胰凝乳蛋白酶的口袋被疏水氨基酸环绕，大到足以容纳一个芳香残基，因此该酶选择裂解芳香氨基酸如Phe和Tyr的羧基侧肽键。而胰蛋白酶口袋的底部有一个带负电荷的Asp189，有利于结合带正电荷Arg和Lys残基。根据上述分析可知：（1）为胰蛋白酶设计一个类似TPCK的亲和标记试剂，可以将TPCK的反应基团—CH2—Cl和类似肽键结构—NH—CH—CO—保留，其余部分更换为带正电荷的Arg或Lys的R基团或其类似物；（2）检验该抑制剂的专一性实际上就是分析其与酶的竞争结合能力，可以设计动力学实验，即分析在没有抑制剂时和有不同浓度抑制剂存在时反应速度随底物浓度的变化；（3）由于弹性蛋白与上述两种酶空间结构和催化机理相似，推测该亲和标记试剂有可能使弹性蛋白酶失活。

36. 酶的疏水环境对酶促反应有何意义？
[答] 酶的活性部位多数位于疏水性的裂缝中，化学基团的反应活性和化学反应的速率在非极性介质和水性介质中有明显差别。当底物分子和酶的活性部位相结合，就被埋在疏水环境中，由于介电常数较低，底物分子与催化基团之间的作用力被明显加强，因此，疏水的微环境大大有利于酶的催化作用。

37.同工酶形成的机制是什么？同工酶研究有哪些应用？
[答] 按照一个基因编码一个蛋白质的理论，同工酶的产生可能是基因分化的产物，而基因的分化又可能是生物进化过程中为适应愈趋复杂的代谢而引起的一种分子进化。而且，在个体发育过程中，从早期胚胎到胎儿组织，再从新生儿到成年个体，随着组织的分化和发育，各种同工酶也有一个分化或转变的过程。同工酶研究的意义主要有：（1）作为遗传标记，已广泛被遗传学家用于遗传分析的研究；（2）同工酶是研究基因表达的良好指标；（3）同工酶分析法在农业上已开始用于优势杂交组合的预测；（4）同工酶分析可用于临床检验；（5）同工酶可以用于代谢调控的研究；（6）对同工酶的对比研究可以找到一些蛋白质结构和功能之间相互关系的规律。

38.一个双螺旋DNA分子中有一条链的成分[A]=0.30，[G]=0.24，（1）请推测这一条链上的[T]，[C]的情况。（2）互补链的[A]，[G]，[T]和[C]的情况。
[答]（1）[T]+[C]=1–0.30–0.24=0.46；（2）[T]=0.30，[C]=0.24，[A]+[G]=0.46。

39.如何看待RNA功能的多样性？
[答] RNA有五方面的功能:(1)控制蛋白质合成；(2)作用于RNA转录后加工与修饰；(3)参与细胞功能的调节；(4)生物催化与其他细胞持家功能；(5)遗传信息的加工和进化；关键在于RNA既可以作为信息分子又可以作为功能分子发挥作用。

40.如果人体有1014个细胞，每个体细胞的DNA含量为6.4×109个碱基对。试计算人体DNA的总长度是多少？是太阳-地球之间距离（2.2×109公里）的多少倍？已知双链DNA每1000个核苷酸重1×10-18g，求人体的DNA的总质量。
[答] 每个体细胞的DNA的总长度为：6.4×109×0.34nm = 2.176×109 nm= 2.176m，
人体内所有体细胞的DNA的总长度为：2.176m×1014 = 2.176×1011km
这个长度与太阳-地球之间距离（2.2×109公里）相比为：2.176×1011/2.2×109 = 99倍，每个核苷酸重1×10-18g/1000=10-21g，所以，总DNA 6.4×1023×10-21=6.4×102=640g。

42.为什么说碱基堆积作用是一种重要的稳定双螺结构的力？
[答] 嘌呤和嘧啶具有疏水性，在细胞中的中性pH条件下难溶于水，在两个碱基上下平行堆积时，碱基之间产生疏水堆积作用。这种堆积作用综合了范德华力和偶极作旋用，降低了碱基和水的接触，所以是一种重要的稳定DNA双螺旋结构的力。

43.（a）计算相对分子质量为3 × 107的双股DNA分子的长度；（b）这种DNA一分子占有的体积是多少？（c）这种DNA一分子含多少圈螺旋？
[答]（a）一个互补成对的脱氧核苷酸残基的平均相对分子质量为618，每个核苷酸使双螺旋上升0.34nm,因此该分子长度为：（3×107/618）×0.34=1.65×104 nm =16.5×10－4cm；(b)该分子可看作长16.5×10－4cm，直径2 × 10－9cm的圆柱体：3.14×(1× 10－9) 2×16.5×10－4 =5.18×10－20cm3；；(c)48544对核苷酸＝4854圈螺旋。

44.如何区分相对分子质量相同的单链DNA与单链RNA？
[答]（1）用专一性的RNA酶与DNA酶分别对两者进行水解。（2）用碱水解，RNA能够被水解，而DNA不被水解。（3）进行颜色反应，二苯胺试剂可以使DNA变成蓝色；苔黑酚（地衣酚）试剂能使RNA变成绿色。（4）用酸水解后，进行单核苷酸的分析（层析法或电泳法），含有U 的是RNA，含有T的是DNA。

45.什么是DNA变性？DNA变性后理化性有何变化？
[答] DNA双链转化成单链的过程成变性。引起DNA变性的因素很多，如高温、超声波、强酸、强碱、有机溶剂和某些化学试剂（如尿素，酰胺)等都能引起变性。 DNA变性后的理化性质变化主要有：（1）天然DNA分子的双螺旋结构解链变成单链的无规则线团，生物学活性丧失；（2）天然的线型DNA分子直径与长度之比可达1：10，其水溶液具有很大的黏度。变性后，发生了螺旋-线团转变，黏度显著降低；（3）在氯化铯溶液中进行密度梯度离心，变性后的DNA浮力密大大增加；（4）沉降系数S增加；（5）DNA变性后，碱基的有序堆积被破坏，碱基被暴露出来，因此，紫外吸收值明显增加，产生所谓增色效应。（6）DNA分子具旋光性，旋光方向为右旋。由于DNA分子的高度不对称性，因此旋光性很强，其[ a ]=150。当DNA分子变性时，比旋光值就大大下降。

46.组成RNA的核苷酸也是以3′,5′-磷酸二酯键彼此连接起来。尽管RNA分子中的核糖还有2′羟基，但为什么不形成2′,5′－磷酸二酯键？
[答] 2′-OH的空间位置与3′-OH和 5′-OH不在同一平面内。故不形成2′，5′-磷酸二酯键。

47.何谓Tm？影响Tm大小的因素有哪些？在实验中如何计算Tm值？
[答] DNA的变性从开始解链到完全解链，是在一个相当窄的温度范围内完成的，在这一范围内，紫外线吸收值的增加量达到最大增加量的50%时的温度为DNA的解链温度（溶解温度，melting temperature,Tm）。Tm值大小主要与GC含量有关，GC含量越高，Tm值越大；另外核酸分子越大，Tm值也越大，此外，溶液pH值，离子强度也影响Tm值。在具体的实验中，Tm值计算公式：Tm=69.3+0.41(G+C%),小于20bp的寡核苷酸Tm=4（G+C）+2（A+T）。

48.什么是核酸杂交？有何应用价值？
[答] 热变性后的DNA片段在进行复性时，不同来源的变性核酸（DNA或RNA）只要有一定数量的碱基互补（不必全部碱基互补），就可形成杂化的双链结构。此种使不完全互补的单链在复性的条件下结合成双链的技术称为核酸杂交。其应用价值：用被标记的已知碱基序列的单链核酸小分子作为探针，可确定待检测的DNA，RNA分子中是否有与探针同源的碱基序列。用此原理，制作探针，再通过杂交，可用于细菌，病毒，肿瘤和分子病的诊断（基因诊断）。

49.超螺旋的生物学意义有哪些?
[答]（1）超螺旋DNA比松弛型DNA更紧密，使DNA分子的体积更小，得以包装在细胞内；（2）超螺旋会影响双螺旋分子的解旋能力,从而影响到DNA与其他分子之间的相互作用；（3）超螺旋有利于DNA的转录、复制及表达调控。

50.DNA双螺旋模型的主要特征是，一条链上的碱基与另一条链上的碱基在同一个平面上配对。Watson和Crick提出，腺嘌呤只与胸嘧啶配对，鸟嘌呤只与胞嘧啶配对。出于什么样的结构考虑，使他们确定这样的配对方案?
[答] DNA分子的Watson-Crick模型是以两条多核苷酸链的糖-磷酸骨架呈有规律的螺旋结构为特征，这种螺旋结构有两个限制：①一条链上的碱基必须与另一条互补链的碱基形成氢键。②使碱基与糖-磷酸骨架相连接的糖苷键必须保持大约1.1nm的间隔。A与T、G与C的配对符合这种限制。若A与G或G与T配对，其间隔太大，以至不适合这种螺旋(即糖苷健间的间隔大于1.1nm)，产生不稳定的膨胀结构，若T与C配对，其间隔太小，若A与C配对，在空间限制范围内不能形成氢键。只有A与T、G与C互补配对，才能保持其间隔约为1.1 nm，也才能在碱基对之间有效地形成氢键，Watson-Crick螺旋结构才稳定。

51.如果降低介质的离于强度会对双螺旋DNA的解链曲线有何影响?如果向介质加入少量的乙醇呢?
[答] 如果降低介质的离子强度，将减少对DNA糖-磷酸骨架的磷酸基负电荷的中和(掩盖)，加大带负电荷磷酸基的彼此排斥，其结果将会降低它的熔点(Tm)。乙醇是非极性的，它的加入会减小稳定双螺旋DNA的疏水作用力，因此也会降低它的熔点。

52.为什么相同相对分子质量的线状DNA比共价闭合的环状DNA能结合更多的溴乙锭？如何利用这一点在氯化铯梯度中分离这两种DNA？为什么共价闭环DNA在含溴乙锭的介质中的沉降速度随溴乙锭的浓度增加出现近似U形的变化？
[答] 溴乙锭插入碱基对之间，共价闭合的DNA比线状双链DNA结构紧密，溴乙锭插入的可能性较少。制备溴乙锭氯化铯梯度，环状DNA插入溴乙锭较少，沉降较快，可以将两者分开。DNA-溴乙锭复合物用异戊醇提取，DNA很容易与溴乙锭分开。超螺旋DNA沉降快，开环和线形DNA沉降慢。共价闭环DNA形成负超螺旋，具有较快的沉降速度。少量溴乙锭插入DNA的碱基对之间，减少负超螺旋密度，使沉降速度减慢，但是大量溴乙锭可以引入正超螺旋，使沉降加快。因此随溴乙锭浓度增加，共价闭环DNA的沉降速度出现近似U形变化。

53.以B族维生素与辅酶的关系，说明B族维生素在代谢中的重要作用。
[答] B族维生素是体内许多重要辅酶的组成成分，所以当B族维生素缺乏时，就会影响到结合酶的活性，使体内的许多代谢发生障碍。①维生素B1是硫胺素焦磷酸（TPP）的组成成分，TPP是α-酮酸氧化脱羧酶的辅酶，当维生素B1缺乏时，使丙酮酸氧化脱羧反应受阻。同时TPP又是转酮醇酶的辅酶，当维生素B1缺乏时，磷酸戊糖代谢障碍，使核酸合成及神经髓鞘中磷酸戊糖代谢受到影响。②维生素B2是FMN和FAD的组成成分。FMN和FAD是体内氧化还原酶的辅基，如琥珀酸脱氢酶、黄嘌呤氧化酶及NADH脱氢酶等。FMN和FAD也参与呼吸链电子传递过程，在生物氧化过程中发挥着重要作用。③维生素PP是NAD+、NADP+的组成成分。NAD+、NADP+在体内是多种不需氧脱氢酶的辅酶，如乳酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶、α-酮戊二酸脱氢酶系等，同时维生素PP也参与呼吸链的电子传递。④维生素B6是磷酸吡哆醛和磷酸吡哆胺的组成成分。磷酸吡哆醛和磷酸吡哆胺是氨基酸代谢中的转氨酶和脱羧酶的辅酶，在氨基酸代谢中发挥着重要作用。⑤泛酸在体内组成ACP和CoA。二者构成酰基转移酶的辅酶，广泛参与糖、脂肪、蛋白质的代谢及肝中的生物转化作用。⑥生物素是体内多种羧化酶的辅酶，如丙酮酸羧化酶等。⑦叶酸的活性形式是四氢叶酸，四氢叶酸是体内一碳单位转移酶的辅酶，分子内部N5、N10两个氮原子能携带一碳单位。一碳单位在体内参加多种物质的合成，如嘌呤、胸腺嘧啶核苷酸等。当叶酸缺乏时，DNA的合成必然受到抑制，骨髓红细胞DNA合成减少，细胞分裂速度降低，细胞体积变大，造成巨幼红细胞性贫血。⑧体内的维生素B12参与同型半胱氨酸甲基化生成甲硫氨酸的反应，催化这一反应的甲硫氨酸合成酶的辅酶是维生素B12，它参与甲基的转移。维生素B12缺乏时，甲基转移反应受阻，不利于甲硫氨酸的生成，同时维生素B12还影响四氢叶酸的再生，使组织中游离的四氢叶酸含量减少，不能重新利用它来转运其他的一碳单位，影响嘌呤、嘧啶的合成，最终导致核酸合成障碍，影响细胞分裂，结果产生巨幼红细胞性贫血。

54.维生素A缺乏时，为什么会患夜盲症？
[答] 所谓夜盲症是指暗适应能力下降，在暗处视物不清。该症状产生是由于视紫红质再生障碍所致。因视杆细胞中有视紫红质，由11-顺视黄醛与视蛋白分子中赖氨酸侧链结合而成。当视紫红质感光时，11-顺视黄醛异构为全反型视黄醛而与视蛋白分离而失色，从而引发神经冲动，传到大脑产生视觉，此时在暗处看不清物体。全反型视黄醛在视网膜内可直接异构为11-顺视黄醛，但生成量少，故其大部分被眼内视黄醛还原酶还原为视黄醇，经血液运输至肝脏，在异构酶催化下转变成11-顺视黄醇，而后再回到视网膜氧化成11-顺视黄醛合成视紫红质，从而构成视紫红质循环。当维生素A缺乏时，血液中供给的视黄醇量不足，11-顺视黄醛得不到足够的补充，视紫红质的合成量减少，对弱光的敏感度降低，因而暗适应能力下降造成夜盲症。

55.为什么缺乏叶酸和维生素B12可引起巨幼红细胞性贫血？
[答] 巨幼红细胞贫血又称恶性贫血，特点是骨髓呈巨幼红细胞增生，胞质和胞核生长成熟不同步，胞核核酸代谢受到影响，成熟不良。此病的产生与叶酸和维生素B12的缺乏有密切关系。单纯因叶酸或维生素B12缺乏所造成的贫血称营养不良性贫血，其机制是合成核苷酸的原料一碳单位缺乏，DNA合成受阻，骨髓幼红细胞DNA合成减少，细胞分裂速度降低，体积增大，而且数目减少。一碳单位来自某些氨基酸的特殊代谢途径。FH4既是一碳单位转移酶的辅酶，又是携带和转移一碳单位的载体。分子内N5、N10两个氮原子能携带一碳单位参与体内多种物质的合成，特别是核酸的合成，一碳单位都是以甲基FH4的形式运输和储存，故甲基FH4的缺乏直接影响一碳单位的生成和利用。FH4的再生是在甲基转移酶的催化下将甲基转移给同型半胱氨酸生成S-腺苷甲硫氨酸，甲基转移酶的辅酶是维生素B12，维生素B12可通过促进FH4的再生而参与一碳单位代谢，当维生素B12缺乏时同样也会影响核酸代谢，影响红细胞的分化及成熟，所以叶酸和维生素B12缺乏都会导致巨幼红细胞性贫血。

56.简述维生素C的生化作用。
[答] 维生素C的生化作用非常广泛，主要有以下两个方面。（1）参与体内多种羟化反应。①促进胶原蛋白的合成，当胶原蛋白合成时，多肽链中的脯氨酸、赖氨酸需羟化生成羟脯氨酸和羟赖氨酸，维生素C是催化反应中羟化酶的辅助因子之一；②参与胆固醇的转化，维生素C是7-α-羟化酶的辅酶，促进胆固醇转变成胆汁酸；③参与芳香族氨基酸的代谢，维生素C参与苯丙氨酸羟化成酪氨酸的反应，酪氨酸转变为对羟苯丙酸的羟化、脱羧、移位等步骤及转变为尿黑酸的反应。（2）作为供氢体参与体内氧化还原反应。①保护巯基酶的活性及GSH的状态，发挥解毒作用；②使红细胞高铁血红蛋白还原为血红蛋白，使其恢复运氧的功能；③使三价铁还原为二价铁，促进铁的吸收；④保护维生素A、E及B免遭氧化，并促进叶酸转变成四氢叶酸。

57.试述G蛋白参与信号传递在细胞代谢调节中的意义。
[答] G蛋白在激素、神经递质等信息分子作用过程中，起信号传递、调节和放大的作用。由于G蛋白家族结构的相似性（指β、γ-亚基）和多样性（指α-亚基），所以它的参与使激素和许多神经递质对机体的调节更复杂、更具多层次，更能适应广泛的细胞功能变化。G蛋白种类很多，它的介入使激素、受体更能适应不同细胞反应和同一细胞反应的多样性，使机体对外界环境变化的应答更灵敏、更准确、更精细。一些毒素如霍乱毒素和百日咳毒素等都是通过G-蛋白的α-亚基ADP核糖基化而失去正常调节功能，导致一系列病理反应。

58.简述cAMP的生成过程及作用机制。
[答] 胰高血糖素、肾上腺素、促肾上腺皮质激素等与靶细胞膜上的特异性受体结合，形成激素-受体复合物而激活受体，通过G蛋白介导，激活腺苷酸环化酶，腺苷酸环化酶催化ATP转化成cAMP和焦磷酸，cAMP在磷酸二酯酶作用下水解为5＇-AMP而丧失作用。cAMP作为激素作用的第二信使对细胞的调节作用是通过激活cAMP依赖性蛋白激酶（蛋白激酶A）来实现的。蛋白激酶A由两个调节亚基和两个催化亚基组成的四聚体别构酶，当四分子cAMP与调节亚基结合后，调节亚基与催化亚基解离，游离的催化亚基催化底物蛋白磷酸化，从而调节细胞的物质代谢和基因表达。活化的蛋白激酶A一方面催化胞质内一些蛋白磷酸化调节某些物质的代谢过程，如使无活性的糖原磷酸化酶激酶b磷酸化，转变成无活性的糖原磷酸化酶激酶α，后者催化糖原磷酸化酶b磷酸化成为有活性的糖原磷酸化酶α，调节糖原的分解。活化的蛋白激酶A另一方面进入细胞核，可催化反式作用因子-cAMP应答元件结合蛋白磷酸化，与DNA上的cAMP应答元件结合，激活受cAMP应答元件调控的基因转录。另外活化的蛋白激酶还可使核内的组蛋白、酸性蛋白及膜蛋白、受体蛋白等磷酸化，从而影响这些蛋白的功能。

59.介绍两条Ca++介导的信号传导途径。
[答] Ca++是体内许多重要激素作用的第二信使，作为第二信使Ca++可通过不同的途径来调节体内的物质代谢过程。①Ca++-磷脂依赖性蛋白激酶途径：乙酰胆碱、去甲肾上腺素、促肾上腺皮质激素等信号分子作用于靶细胞膜上的特异受体，通过G蛋白激活磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C而水解膜组分磷脂酰肌醇4，5-二磷酸而生成DG和IP3。IP3从膜上扩散至胞质，与内质网和肌浆网上的IP3受体结合，促进Ca++释放使胞质内Ca++浓度升高。DG在磷脂酰丝氨酸和Ca++的配合下激活蛋白激酶C，对机体的代谢、基因表达、细胞分化和增殖起作用。②Ca++-钙调蛋白依赖性蛋白激酶途径：钙调蛋白有四个Ca++结合位点，当胞浆Ca++升高时，Ca++与钙调蛋白结合，使其构象发生改变而激活Ca++-钙调蛋白依赖性蛋白激酶，后者可使许多蛋白质的丝氨酸或苏氨酸残基磷酸化，引起蛋白质活性升高或降低，影响机体的代谢过程。如活化的Ca++-钙调蛋白依赖性蛋白激酶能激活腺苷酸环化酶而加速cAMP的生成，也能激活磷酸二酯酶而加速cAMP的降解；它还能激活胰岛素受体的酪氨酸蛋白激酶。

60.腺苷酸环化酶所催化的反应如下： ATP→cAMP +PPi，其平衡常数Keq=0.065，如果ATP水解成AMP + PPi，△Go′=-33.44 kJ/mol，试计算cAMP水解成AMP的△Go′是多少？
[答] 由于已知反应 ATP→cAMP +PPi 的Keq，根据△Go′与Keq的关系得：
△Go′=-2.303RTlgKeq=-2.303×8.314×10-3×298×lg0.065=15.61 kJ/mol
那么逆反应cAMP +PPi→ATP的△Go′为 -15.61 kJ/mol
又已知ATP→AMP + PPi 的△Go′=-33.44 kJ/mol
所以cAMP→AMP的△Go′=-15.61 kJ/mol+（-33.44 kJ/mol）=-49.05 kJ/mol

62.计算1摩尔葡萄糖在肝脏细胞中彻底氧化成CO2和H2O，可产生多少摩尔ATP？如果有鱼藤酮存在，理论上又可产生多少摩尔ATP？
[答] 组织中没有鱼藤酮时：1摩尔葡萄糖→2摩尔丙酮酸，净生成2摩尔ATP并有2摩尔NADH?H+产生（细胞质中生成）；2摩尔丙酮酸→2摩尔乙酰辅酶A+2摩尔CO2，生成2摩尔NADH?H+；2摩尔乙酰辅酶A→4摩尔CO2，共生成6摩尔NADH?H+、2摩尔FADH2、2摩尔GTP。对肝脏细胞而言，细胞质中生成的2摩尔NADH?H+，是通过苹果酸-天冬氨酸穿梭进入线粒体的，进入线粒体的依然是2摩尔NADH?H+。NADH?H+生物氧化时的磷氧比值为2.5，FADH2的磷氧比值为1.5，所以葡萄糖彻底氧化产生的ATP为（4＋6）2.5＋2×1.5＋4=32摩尔。如果组织中有鱼藤酮存在，生成的NADH?H+不产生ATP，所以ATP为2×1.5＋4=7摩尔。

63.试比较电子传递抑制剂、氧化磷酸化抑制剂、和氧化磷酸化作用解偶联剂对生物氧化作用的影响。
[答] 电子传递抑制剂可使电子传递链的某一部位阻断，电子不能传递，线粒体内膜两侧的质子浓度差不能形成，氧的消耗停止，ATP自然也不能合成。氧化磷酸化抑制剂并不直接抑制电子传递，它的作用是抑制ATP酶，使ATP合成停止，由于线粒体内膜两侧存在较高的质子浓度差，电子传递和氧的消耗也被抑制。氧化磷酸化作用解偶联剂使电子传递和氧化磷酸化两个过程分离，结果是电子传递失去控制，氧的消耗增加，但不能形成线粒体内膜两侧的质子浓度差，ATP也无法合成。

64.在一个具有完全细胞功能的哺乳动物肝脏细胞匀浆体系中，当1摩尔下列底物完全氧化成CO₂和H₂O时，能产生多少ATP？①乳酸； ② 柠檬酸； ③磷酸稀醇式丙酮酸。
[答] ① 乳酸彻底氧化成CO₂和H₂O的途径如下：
乳酸+NAD→丙酮酸+NADH H+（乳酸脱氢酶），此反应在细胞溶胶（细胞浆）中进行。在肝脏细胞匀浆体系中，细胞溶胶中生成的NADH是通过苹果酸-天冬氨酸穿梭进入线粒体内氧化。
丙酮酸+NAD→乙酰辅酶A + NADH?H+ （线粒体，丙酮酸脱氢酶系）
乙酰辅酶进入三羧酸循环：（线粒体，三羧酸循环相关酶）
乙酰辅酶A+3 NAD+ +FAD++GDP +Pi→2摩尔CO2 +3 NADH?H+ +FADH2+GTP
1摩尔乳酸彻底氧化成CO2和H2O生成ATP的摩尔数为：5×2.5+1×1.5+1（GTP）=15摩尔
② 柠檬酸彻底氧化成CO2和H2O的途径如下：
柠檬酸首先沿三羧酸循环生成草酰乙酸，该过程共进行4次脱氢，生成3 摩尔NADH?H+、1摩尔FADH2、1摩尔GTP（线粒体，三羧酸循环相关酶）
草酰乙酸暂时脱离三羧酸循环，脱羧生成丙酮酸。丙酮酸氧化脱羧转变成乙酰辅酶A：
丙酮酸 +NAD→乙酰辅酶A + NADH?H+（线粒体丙酮酸脱氢酶系）
乙酰辅酶进入三羧酸循环氧化：乙酰辅酶A+ 3 NAD+ +FAD++GDP +Pi→2摩尔CO2 +3 NADH?H+ +FADH2+GTP
FADH2呼吸链的磷氧比值为1.5，NADH呼吸链的磷氧比值为2.5，1摩尔柠檬酸彻底氧化成CO2和H2O生成ATP的摩尔数为：7×2.5+2×1.5+2（GTP）=22.5摩尔
③ 磷酸稀醇式丙酮酸彻底氧化成CO2和H2O的途径如下：
磷酸稀醇式丙酮 + ADP +Pi→丙酮酸 + ATP；丙酮酸+NAD→乙酰辅酶A + NADH?H+
乙酰辅酶进入三羧酸循环：（线粒体三羧酸循环相关酶）
乙酰辅酶A+ 3 NAD+ +FAD++GDP +Pi→2摩尔CO2 +3 NADH?H+ +FADH2+GTP
1摩尔磷酸稀醇式丙酮酸彻底氧化成CO2和H2O生成ATP的摩尔数为：4×2.5+1×1.5+2（GTP+ATP）=13.5摩尔

65.从ATP的结构特点说明其在机体细胞能量传递中的作用。
[答] ATP（腺苷-5′-三磷酸，简称三磷酸腺苷）是高能磷酸化合物的典型代表，一个ATP分子由一分子腺嘌呤、一分子核糖、和三个相连的磷酸基团组成。三个磷酸基团依次与核糖5′-羟基形成磷酸酯，分别称为α、β、γ磷酸基团，α磷酸基团与腺苷之间的磷酸酯键为普通磷酯键，而β、γ磷酸基团之间和β、α磷酸基团之间的磷酸酯键为高能磷酸键，β、γ磷酸基团在水解或者基团转移时都能释放出30.48 kJ/mol的自由能，而普通磷酯键在水解或者基团转移时能释放出的自由能在20 kJ/mol以下，在生物机体内细胞内还有一些高能, 化合物，在磷酸基团水解或者基团转移时能释放出40～60 kJ/mol的自由能，甚至更多。这些高能化合物（如磷酸肌酸、磷酸稀, 醇式丙酮酸等）可将其高能磷酸基团转移给ADP，生成的 ATP分子又可将其, 高能磷酸基团转移给其它化合物使之获得能量，所以ATP不仅是机体细胞最直接的能源，同时ATP在能量的传递中起中间体, 的作用。

66.分离的完整线粒体悬浮液中有过量的ADP、O₂和谷氨酸，谷氨酸在线粒体基质中可产生NADH和FADH₂，如果在该体系中加入下列物质，会对氧的消耗和ATP的合成产生什么影响？(1) 二硝基苯酚，(2)二硝基苯酚，同时加入HCN，(3)加入寡霉素，然后加入二硝基苯酚。
[答] (1) 二硝基苯酚是一种氧化磷酸化的解偶剂，它可以将质子从膜间隙带入线粒体基质，从而破坏质子梯度，使 ATP的合成停止。电子传递链将质子泵出线粒体的过程被加强，从而加快了氧的消耗。(2) HCN阻止了电子从细胞色素氧化酶到氧的传递，从而使氧的消耗停止，ATP的合成受阻。(3) 寡霉素阻断质子通过F1F0-ATP酶的通道，使ATP的合成受阻。由于质子泵出线粒体需要克服更高的能障，故电子传递被抑制，氧的消耗停止。随后加入二硝基苯酚，ATP的合成仍然因为寡霉素存在而被抑制，但质子梯度被二硝基苯酚破坏，所以消除了寡霉素对电子传递的抑制，氧的消耗继续进行，只是没有ATP的, 合成。

67.葡萄糖分子的第二位用14C标记，在有氧情况下进行彻底氧化。问经过几轮三羧酸循环，该同位素碳可作为CO₂释放？
[答] 经代谢转化，葡萄糖第二位标记的14C出现在丙酮酸的羰基上，即 CH3-﹡CO-COOH；进一步氧化产生的CH3-﹡CO-CoA进入三羧酸循环后，经第一轮循环标记碳原子全部进入草酰乙酸，形成两种异构体: HOO﹡C-CO-CH2-COOH 和HOO﹡C-CH2-CO-COOH,在第二轮三羧酸循环中，两种异构体中的标记碳原子都可在脱羧反应中以二氧化碳释放。

68.糖酵解和糖异生作用中各有三个可能产生无效循环的位点，这三个位点在两条途径中分别由什么酶来催化？以两条途径中果糖-6-磷酸与果糖-1,6-二磷酸之间的转变为例说明细胞是如何避免无效循环的。
[答] 在糖酵解中，葡萄糖→葡萄糖-6-磷酸、果糖-6-磷酸→果糖-1,6-二磷酸、磷酸烯醇式丙酮酸→丙酮酸三个不可逆反应位点分别由己糖激酶、磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶催化；在糖异生中，葡萄糖-6-磷酸→葡萄糖、果糖-1,6-二磷酸→果糖-6-磷酸、丙酮酸→草酰乙酸→磷酸烯醇式丙酮酸三个不可逆反应位点分别由葡萄糖-6-磷酸酶、果糖-1,6-二磷酸酶、丙酮酸羧化酶和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶催化。催化果糖-6-磷酸与果糖-1,6-二磷酸转化的酶是关键的调控酶。在糖酵解中，磷酸果糖激酶的正效应物为AMP、果糖-2,6-二磷酸，负效应物为柠檬酸、ATP，胰高血糖素可以通过共价修饰使果糖-2,6-二磷酸水平降低，从而降低糖酵解速率；在糖异生作用中，果糖-1,6-二磷酸酶催化果糖-1,6-二磷酸转变成果糖-6-磷酸，该酶的正效应物为ATP、柠檬酸，而负效应物为AMP、果糖-2,6-二磷酸。胰高血糖素通过共价修饰使果糖-2,6-二磷酸水平降低，促进糖异生作用。可见两种酶的效应物对两条途径的调节正好相反，这种协调控制保证了糖酵解和糖异生途径一条开放时，另一条关闭，从而避免了无效循环。

69.已知磷酸稀醇式丙酮酸转变成丙酮酸时，△G0’为31.38 kJ/mol，计算在标准状况下，当[ATP]/[ADP]=10时，磷酸稀醇式丙酮酸和丙酮酸的浓度比。
[答] 磷酸稀醇式丙酮酸+ADP+Pi→丙酮酸+ATP，△G0’=-31.38 kJ/mol
△Go，=-2.303RT㏒Keq=-2.303×8.31×10-3 kJ/mol?K×298 K×㏒Keq
即：-31.38 kJ/mol=-2.303×8.31×10-3kJ/mol?K×298 K×㏒Keq
㏒Keq=5.5，查反对数表得：Keq=3.16×105
Keq=[ATP] ×[丙酮酸]/[ 磷酸稀醇式丙酮酸] × [ADP]
[丙酮酸]/[ 磷酸稀醇式丙酮酸]=10÷ Keq=10÷3.16×105=3.16×10-5
[ 磷酸稀醇式丙酮酸]/[丙酮酸] =1/3.16×10-5=3.16×104

70.计算由2摩尔丙酮酸转化成1摩尔葡萄糖需要提供多少摩尔的高能磷酸化合物？
[答] 首先，2摩尔丙酮酸 +2CO2+2ATP→2草酰乙酸+2ADP+2Pi； 2草酰乙酸+2GTP→2磷酸稀醇式丙酮酸+2GDP+2CO2；其次，2摩尔磷酸稀醇式丙酮酸沿糖酵解途径逆行至转变成2摩尔甘油醛-3-磷酸，其中在甘油酸-3-磷酸转变成甘油酸-1,3-二磷酸过程中，消耗2摩尔ATP；甘油酸-1,3-二磷酸转变成甘油醛-3-磷酸中，必须供给2摩尔的NADH?H+。最后，2摩尔的磷酸丙糖先后在醛羧酶、果糖-1,6-二磷酸酶、异构酶、葡萄糖-6-磷酸酶作用下，生成1摩尔葡萄糖，该过程无能量的产生与消耗。从上述三阶段可看出，2摩尔丙酮酸转化成1摩尔葡萄糖需要提供6摩尔高能磷酸化合物，其中4摩尔为ATP，2摩尔为GTP。

71.简要说明甘油彻底氧化成CO₂和H₂O的过程，并计算1摩尔甘油彻底氧化成CO₂和H₂O净生成多少摩尔的ATP？
[答] 甘油 + ATP→α-磷酸甘油 + ADP；α-磷酸甘油 + NAD+→ NADH?H+ + 磷酸二羟丙酮；磷酸二羟丙酮→甘油醛-3-磷酸；甘油醛-3-磷酸 + NAD++ Pi→甘油酸1,3-二磷酸 + NADH?H+；甘油酸1,3-二磷酸 + ADP→甘油酸-3-磷酸 + ATP；甘油酸-3-磷酸→甘油酸-2-磷酸→磷酸稀醇式丙酮酸；磷酸稀醇式丙酮酸+ ADP→ 丙酮酸 + ATP；丙酮酸 + NAD+→乙酰辅酶A + NADH?H+ + CO2；然后进入乙酰辅酶A三羧酸循环彻底氧化，经过4次脱氢反应生成3摩尔NADH?H+、1摩尔FADH2、以及2摩尔CO2，并发生一次底物水平磷酸化，生成1摩尔GTP。依据生物氧化时每1摩尔NADH?H+和1摩尔FADH2 分别生成2.5摩尔、1.5，1摩尔甘油彻底氧化成CO2和H2O生成ATP摩尔数为6×2.5＋1×1.5＋3－1=18.5

72.简述血糖的来源和去路，人体如何维持血糖水平的恒定？
[答]（1）血糖的来源：食物淀粉的消化吸收，为血糖的主要来源；贮存的肝糖原分解，是空腹时血糖的主要来源；非糖物质如甘油、乳酸、大多数氨基酸等通过糖异生转变而来。（2）血糖的去路：糖的氧化分解供能，是糖的主要去路；在肝、肌肉等组织合成糖原，是糖的贮存形式；转变为非糖物质，如脂肪、非必需氨基酸等；转变成其他糖类及衍生物如核糖、糖蛋白等；血糖过高时可由尿排出。（3）人体血糖水平的稳定：主要靠胰岛素、胰高血糖素、肾上腺素等激素来调节。血糖水平低时，刺激胰高血糖素、肾上腺素的分泌，促进糖原分解和糖异生作用、抑制葡萄糖的氧化分解，使血糖水平升高。当血糖水平较高时，刺激胰岛素分泌，促进糖原合成、抑制糖异生作用，加快葡萄糖的氧化分解，从而使血糖水平下降。

73.在EMP途径中，磷酸果糖激酶受ATP的反馈抑制，而ATP却又是磷酸果糖激酶的一种底物，试问为什么在这种情况下并不使酶失去效用？
[答] 磷酸果糖激酶（PFK）是一种调节酶，又是一种别构酶。ATP是磷酸果糖激酶的底物，也是别构抑制剂。在磷酸果糖激酶上有两个ATP的结合位点，即底物结合位点和调节位点。当机体能量供应充足（ATP浓度较高）时，ATP除了和底物结合位点结合外，还和调节位点结合，是酶构象发生改变，使酶活性抑制。反之机体能量供应不足（ATP浓度较低），ATP主要与底物结合位点结合，酶活性很少受到抑制。

74.在充分光照下，25℃，pH值7的离体叶绿体中，ATP、ADP和Pi的稳态浓度分别为3mmol/L、0.1 mmol/L、10 mmol/L。问（a）在这些条件下，合成ATP反应的△G是多少？（b）在此叶绿体中光诱导的电子传递提供ATP合成所需的能量（通过质子电动势），在这些条件下合成1摩尔ATP所需的最小电势差（△E0′）是多少？假设每产生1摩尔ATP要求2摩尔电子（2e-）通过电子传递链。
[答]（a）ATP→ ADP + Pi反应的标准自由能变化△Go′=-30.50 KJ/mol ，那么ADP+ Pi→ATP反应的标准自由能变化△Go′=+30.50 kJ/mol，因此，当ATP、ADP和Pi的稳态浓度分别为3mmol/L、0.1 mmol/L、10 mmol/L时，ADP + Pi→ATP反应的自由能变化为：
△G =△Go′+2.303RTlgKeq
=30.50 +2.303×8.31×10-3×298×lg[3×10-3/（0.1×10-3×10×10-3）]
=30.50+5.71×3.4771 =50.35 （kJ/mol）
（b）如果此时△G全部合成ATP，体系自由能的变化为负，再根据 -△Go′=- nF△E0′得：
-50.35=-2×96.49×△E0′，△E0′=50.35÷（2×96.49）=0.26 V

75.说明knoop的经典实验对脂肪酸氧化得到的结论。比较他的假说与现代β-氧化学说的异同。
[答] knoop分别在偶数和奇数碳的脂肪酸分子的末端甲基接上苯基，用这种带“示踪物”的脂肪酸喂狗，示踪物苯基在体内不被代谢，而以某一特定的有机化合物随尿排出。Knoop发现，偶数碳的脂肪酸被标记后喂狗，尿液中出现的是苯乙酸的衍生物苯乙尿酸，奇数碳原子的脂肪酸被标记后喂狗，尿液中出现的苯甲酸的衍生物苯甲尿酸。他由此推论：脂肪酸氧化是从羧基端的β-碳原子开始的，每次氧化降解一个2碳单元的片段。他的假说与现代β-氧化学说的相同之处是降解始发于羧基端的第二位（β-位）碳原子，在这一处断裂切掉两个碳原子单元。与现代β-氧化学说的不同之处是：β-氧化的起始阶段需要水解ATP活化脂肪酸, 以脂酰CoA的形式进行氧化,反应的中间产物全部都是结合在CoA上，反应过程是由多种酶协同催化的，切掉的两个碳原子单元是乙酰CoA，而不是乙酸分子，反应过程中脱下来的氢能够经呼吸链的传递生成ATP。

76.计算一分子硬脂酸彻底氧化成CO₂和H₂O，产生的ATP分子数，并计算每克硬脂酸彻底氧化产生的自由能。
[答] （1）一分子硬脂酸需要经过8轮β氧化，生成9个乙酰CoA，8个FADH2 和8NADH，9个乙酰CoA可生成ATP：10×9=90个；8个FADH2可生成ATP ：1.5×8=12个；8个NADH可生成ATP：2.5×8=20个；以上总计为122个ATP，但是硬脂酸活化为硬脂酰CoA时消耗了两个高能磷酸键，一分子硬脂肪酸净生成120个ATP。（2）120个ATP水解的标准自由能为120×（－30.54）KJ=－3664.8KJ，硬脂肪酸的相对分子质量为256。故1克硬脂肪酸彻底氧化产生的自由能为－3664.8/256=－13.5KJ。

77.试从脂类代谢紊乱角度分析酮症、“脂肪肝”和动脉粥样硬化的发病原因。（复旦大学2000年考研题）
[答] （1）酮症：在糖尿病或糖供给障碍等病理状态下，胰岛素分泌减少或作用低下而胰高血糖素、肾上腺素等分泌上升，导致脂肪动员增强，脂肪酸在肝内的分解增多，酮体的生成也增多，同时，由于主要来源于糖代谢的丙酮酸减少，使草酰乙酸也减少，导致了乙酰CoA的堆积，此时肝外组织的酮体氧化作用减少，结果就出现了酮体过多积累在血中的酮症。（2）脂肪肝：肝细胞内的脂肪来源多，去路少导致脂肪积存。原因有：①最多见的是肝功能低下，合成脂蛋白能力下降，导致肝内脂肪运出障碍；②糖代谢障碍导致脂肪动员增强，进入肝内的脂肪酸增多；③肝细胞内用于合成脂蛋白的磷脂缺乏；④患肝炎后，活动过少使能量消耗减少，糖转变成脂肪而存积。（3）动脉粥样硬化：血浆中LDL增多或HDL下降均可使血浆中胆固醇容易在动脉内膜沉积，久之则导致动脉粥样硬化。

78.说明真核生物体内脂肪酸合酶的结构与功能。
[答] 在植物体内，脂肪酸合酶是由不同的七种多肽链的聚合体和ACP组成的多酶体系。酵母中，脂肪酸合酶由酰基载体蛋白（ACP）和6个酶构成，这6个酶定位为两个多功能多肽链，它们分别是乙酰CoA-ACP转酰酶、丙二酸单酰CoA-ACP转酰酶、β-酮酰-ACP合酶、β-酮酰-ACP还原酶、β-羟酰-ACP脱水酶、烯酰-ACP还原酶；动物中，脂肪酸合酶包含有7个酶和一个ACP，其中6个酶和酵母中的相同，另一个为软脂酰-ACP硫酯酶。ACP是“acyl carrier proterin”的简写符号，是一个相对分子质量低的蛋白质，它没有酶的活性，在脂肪酸合成中犹如CoA在脂肪酸降解中的作用，仅作为脂酰基的载体。它的辅基是ACP的丝氨酸残基上结合的4′-磷酸泛酰巯基乙胺，其末端的－SH基是携带脂酰基的功能部位。ACP可把脂酰基从一个酶转移到另一个酶，因而被称作 “酰基载体蛋白”。在脂肪酸降解中，同样的磷酸泛酰巯基乙胺又是CoA的一部分。这个长链的4′-磷酸泛酰巯基乙胺分子犹如“摆臂”，把底物在酶复合体上从一处的催化中心转移到另一处。

79.脂肪酸氧化和脂肪酸的合成是如何协同调控的？
[答] 脂肪酸氧化的限速步骤是脂肪酸从胞质到线粒体的转运，所以肉碱-酰基转移酶Ⅰ是脂肪酸氧化的限速酶。脂肪酸合成的限速酶是乙酰CoA羧化酶，催化乙酰CoA生成丙二酸单酰CoA。丙二酸单酰CoA可促进脂肪酸合成，抑制肉碱-酰基转移酶Ⅰ的活性，这样当脂肪酸合成旺盛时，脂肪酸的分解必然会停止，如此进行两条相反途径的协同调控。

80.试比较脂肪酸合成和脂肪酸β-氧化的异同。
[答] 脂肪酸的生物合成，植物中是在叶绿体及前质体中进行，合成4～16碳及16碳以上的饱和脂肪酸。动物是在胞液中进行，只合成16碳饱和脂肪酸，长于16碳的脂肪酸是在内质网或线粒体中合成。就胞液中16碳饱和脂肪酸的合成过程来看，与β－氧化过程有相似之处，但是合成过程不是β-氧化过程的逆转, 脂肪酸合成和脂肪酸β氧化的异同可归纳如下：（1）两种途径发生的场所不同，脂肪酸合成主要发生于细胞浆中，分解发生于线粒体；（2）两种途径都有一个中间体与载体相连，脂肪酸合成为ACP，分解为CoA；（3）在两种途径都有4步反应，脂肪酸合成是缩合，还原，脱水和还原，脂肪酸分解是氧化，水合，氧化和裂解。虽然从化学途径二者互为逆反应。但他们的反应历程不同，所用的辅助因子也不同；（4）两种途径都有原料转运机制，在脂肪酸合成中，有三羧酸转运机制将乙酰CoA从线粒体转运到细胞浆，在降解中，有肉碱载体系统将脂酰CoA从细胞浆转运到线粒体；（5）两种途径都以脂肪酸链的逐次轮番的变化为特色，在脂肪酸合成中，脂肪酸链获得2碳单位而成功延伸，在降解中则是以乙酰CoA形式的2碳单位离去，以实现脂肪酸链的缩短；（6）脂肪酸合成时，是以分子的甲基一端开始到羧基端为止，降解则是相反的方向，羧基的离去为第一步。（7）羟酯基中间体在脂肪酸合成中是D-构型，但是在降解中为L-构型；（8）脂肪酸合成由还原途径构成，需要NADPH参与，脂肪酸分解由氧化途径构成，需要FAD和NAD+的参与；（9）在动物体中，脂肪酸合酶是一条多肽链构成的多功能酶，而脂肪酸的分解是由多种酶协同催化的。以上是胞液中脂肪酸合成过程和在线粒体中β-氧化作用的重要异同之处。在线粒体中，脂肪酸的合成反应是β-氧化反应的逆过程。

81.血浆脂蛋白有哪几类？并说明各自的来源、化学组成特点和主要生理功能。
[答] 血浆脂蛋白有两种分类法：超速离心法和电泳法。超速离心法可根据脂蛋白的密度不同分为四类：乳糜微粒(CM)，极低密度脂蛋白(VLDL)，低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)。电泳法主要根据脂蛋白的形状、大小和带电多少不同而在电场中有不同迁移率分为：α-脂蛋白、前β-脂蛋白、β-脂蛋白和乳糜微粒四类。两种分类法相对应的名称及各种血浆脂蛋白的来源、化学组成特点和主要生理功能见下表。
分类电泳分类 CM preβ-LP β-LP α-LP
密度分类 CM VLDL LDL HDL
来源小肠粘膜细胞肝细胞血浆肝、小肠
化学组成特点
主要生理功能富含TG（占80％～95％）富含TG（占60％～70％）富含Ch（占48％～50％）富含蛋白质（占80％～95％）
转运外源性TG及Ch 转运内源性TG 转运内源性Ch 逆向转运Ch

82.乙酰CoA羧化酶在脂肪酸合成中起调控作用，试述其调控机制。
[答] 乙酰-CoA羧化酶在脂肪酸合成中将乙酰-CoA转化为丙二酸单酰-CoA，后者是脂肪酸合成的重要起始物之一，乙酰-CoA羧化酶催化的反应是脂肪酸合成中的限速步骤，是脂肪酸合成调控的关键所在，在脊椎动物中，脂肪酸合成的主要产物，软脂酰-CoA使该酶的反馈抑制剂，当线粒体乙酰-CoA的浓度增高，ATP也增高时，柠檬酸从线粒体释放出来，转化为细胞液乙酰CoA，同时成为乙酰-CoA羧化酶活化的别构信号。乙酰-CoA羧化酶还受由胰高血糖素和肾上腺素皮质激素激发的磷酸化修饰的抑制。它的活化型为乙酰-CoA羧化酶的聚合物，当磷酸化时这个聚合物解离成为单体，遂失去活性。可以说，乙酰-CoA羧化酶的活性取决于二者平衡的调控，柠檬酸把平衡引向聚合一侧，也就是促进脂肪酸合成，软脂酰-CoA则把平衡引向单体一侧，就是抑制脂肪酸合成，软脂酰-CoA是脂肪酸合成的产物，它的作用可以称为反馈抑制。

83.简述载脂蛋白（即apo1ipoprotein）的分类、组成特点及其主要功能。
[答] 血浆脂蛋白中的蛋白质部分称载脂蛋白(apo)，在肝和小肠粘膜细胞中合成。至今已从人血浆中分离出18种apo，主要包括：apoA、B、C、D、E等5类。其中，apoA又分为AI、AⅡ、AIV；apoB又分为B100及B48 ；apoC分为CI、CⅡ、CⅢ，CⅢ根据其所含唾液酸的数目又分为CⅢ0、CⅢ1、和CⅢ2； apoE根据其组成及等电点不同分为El、E3、E4。绝大多数apo的一级结构已经阐明。不同脂蛋白所含的apo不同。载脂蛋白在分子结构上具有一定特点，往往含有较多的双性α-螺旋结构，分子的一侧极性较高，可与水溶剂及磷脂或胆固醇极性区结合，构成脂蛋白的亲水面，分子的另一侧极性较低，可与非极性的脂类结合，构成脂蛋白的疏水核心区。apo的主要功能如下：① 结合和转运脂质，稳定脂蛋白结构。apo大多具有双性α-螺旋结构(amphipathic α-helix)，沿螺旋纵轴同时存在亲脂非极性面和亲水的极性面，有利于结合脂质和稳定脂蛋白结构。②调节脂蛋白代谢关键酶的活性，如apoCⅡ是脂蛋白脂肪酶(LPL)不可缺少的激活剂；apoAI则为卵磷脂胆固醇脂酰转移酶(LCAT)的激活剂；apoAⅡ有激活肝脂肪酶(HL)的作用等。③参与脂蛋白受体的识别，如apoB100及apoE参与LDL受体的识别；apoAI参与HDL受体的识别；apoE参与apoE受体的识别等。由于各种脂蛋白主要通过受体途径代谢，因此apo影响和决定着脂蛋白的代谢。④参与脂蛋白间的脂质交换，脂质交换蛋白(LTP)包括：胆固醇酯转运蛋白(CETP)，促进CE从HDL转移至VLDL-IDL及LDL，磷脂转运蛋白(PTP)，促进PL从CM和VLDL转移至HDL。

84.简述影响和调节胆固醇合成的主要因素。
[答] 影响和调节胆固醇合成主要因素是：①饥饿与禁食使HMG-CoA还原酶合成减少，活性降低．可抑制肝合成胆固醇。②摄取高糖，高饱和脂肪酸膳食后，肝HMG-CoA还原酶活性增高，胆固醇合成增多。③胰岛素能使HMG-CoA还原酶合成增多，从而增加胆固醇合成。④胰高血糖素及皮质醇能抑制HMGCoA还原酶，从而减少胆固醇合成。

85.丙氨酸、乳酸和丙酮酸具有相似的结构，通过计算说明在肝脏组织中，等摩尔的丙氨酸、乳酸和丙酮酸完全氧化，哪种物质产能更高？（南开大学2002考研题）
[答] 乳酸完全氧化时，首先转变成丙酮酸，然后丙酮酸转变成乙酰辅酶A，乙酰辅酶A进入三羧酸循环完全氧化。乳酸 + NAD→丙酮酸+NADH?H+ （细胞质中进行），丙酮酸+ NAD→乙酰辅酶A+ NADH?H+ （线粒体中进行），1摩尔乙酰辅酶A进入三羧酸循环完全氧化生成2摩尔CO2 、3摩尔NADH?H+、1摩尔FADH2 、1摩尔GTP。1摩尔乳酸完全氧化产生ATP数=2.5×5＋1.5×1＋1=15；丙氨酸氧化时，首先1摩尔丙氨酸与1摩尔α-酮戊二酸在转氨酶作用下生成1摩尔丙酮酸、1摩尔谷氨酸。谷氨酸脱氢重新转变成α-酮戊二酸并生成1摩尔NH4+ 和1摩尔NADH?H+。丙酮酸氧化过程同上述，1摩尔丙酮酸完全氧化产能2.5×4 ＋1.5×1＋1=12.5摩尔的ATP。另外从丙氨酸上脱下的氨对机体是有毒害的，必须转化成尿素给予清除。合成1摩尔尿素需要2摩尔的氨、1摩尔CO2、并且消耗4摩尔的ATP（实际消耗3摩尔ATP，断裂4个高能磷酸键），这样清除1摩尔的氨，相当于消耗2摩尔ATP，所以1摩尔丙氨酸完全氧化可产生ATP数=12.5＋2.5-2=13摩尔；通过计算可知等摩尔的丙氨酸、乳酸和丙酮酸完全氧化时，乳酸产能高于丙氨酸，丙氨酸又高于丙酮酸。

86.在氨基酸的生物合成中，哪些氨基酸与三羧酸循环中间物有关？哪些氨基酸与糖酵解和戊糖磷酸途径有直接联系？
[答] 三羧酸循环的中间体α-酮戊二酸可为谷氨酸族氨基酸提供骨架原子，包括谷氨酸、谷氨酰胺、鸟氨酸、精氨酸；中间体草酰乙酸可为天冬氨酸、天冬酰胺、甲硫氨酸、苏氨酸、赖氨酸提供骨架原子。糖酵解中的中间体丙酮酸和甘油酸-3-磷酸是丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、甘氨酸、半胱氨酸碳骨架的来源。糖酵解中的磷酸烯醇式丙酮酸和戊糖磷酸途径中的赤鲜糖-4-磷酸是植物、微生物体内合成苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸碳骨架的直接来源；戊糖磷酸途径生成的核糖-5-磷酸是组氨酸合成的重要前体。

87.尿素循环和三羧酸循环之间有哪些联系？
[答] 尿素循环中生成的延胡索酸需经过三羧酸循环转变成草酰乙酸，然后通过转氨基作用形成天冬氨酸，再进入尿素循环中；三羧酸循环提供尿素循环所需的ATP和CO₂。

88.谷氨酸经转氨基作用生成α-酮戊二酸，试问1摩尔谷氨酸彻底氧化成CO2和H2O共生成多少摩尔的ATP？并简要解释其氧化产能途经。
[答] 1mol谷氨酸氧化脱氨基产生1 mol NADH,、1摩尔a-酮戊二酸和1摩尔氨，a-酮戊二酸进入三羧酸循环转化变成草酰乙酸，伴随产生2mol NADH H+,1mol FADH2 和 1mol ATP；草酰乙酸脱羧生成丙酮酸，丙酮酸氧化脱羧生产1摩尔乙酰CoA和1摩尔NADH H+，1摩尔乙酰CoA进一步氧化成CO2、 H2O，可产生10 mol ATP。这样1mol谷氨酸氧化成CO2、 H2O和氨形成ATP总量为10 +3×2.5+ 1×1.5+1=20 mol ATP， NH3 合成尿素，消耗了3 mol ATP，故谷氨酸彻底氧化成CO2、 H2O和尿素同时净合成17mol ATP。

89.单克隆抗体是通过杂交瘤技术制备的。杂交瘤细胞是经抗原免疫的B细胞和肿瘤细胞的融合细胞。为便于筛选融合细胞，选用次黄嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷（HGPRT-）的肿瘤细胞和正常B细胞融合后在HAT（次黄嘌呤、氨甲蝶呤、胞苷）选择培养基中培养，此时只有融合细胞才能生长和繁殖。请解释选择原理。
[答] 细胞内核苷酸合成有两条途径，一是从头合成途径，另一条是补救途径。对于B细胞，由于不能在培养基上繁殖，所以未融合的B细胞不能在培养基上繁殖。对于肿瘤细胞，因为是HGPRT缺陷型，因而它不能通过补救途径合成核苷酸；又因为选择性培养基HAT中含氨甲蝶呤，它是叶酸的拮抗剂，叶酸是嘌呤和嘧啶核苷酸从头合成途径中转移一碳单位的辅酶（四氢叶酸）的来源，所以氨甲蝶呤抑制了核苷酸的从头合成途径，这样未融合的肿瘤细胞也不能在选择性培养基上生长和繁殖，只有融合细胞具有了双亲的遗传性，才能在HAT选择性培养基中利用补救途径合成核苷酸，从而生长和繁殖。

90.怎样确定双向复制是DNA复制的主要方式，以及某些生物的DNA采取单向复制？
[答] 通过放射自显影方法，在复制开始时，先用低放射性的3H-胸腺嘧啶核苷标记大肠杆菌。经数分钟后，再转移到含有高放射性的3H -胸腺嘧啶核苷的培养基中继续标记。这样在放射自显影图上，复制起始区的放射性标记密度比较低，感光还原的银颗粒密度就较低；继续合成区标记密度较高，银颗粒密度也较高。对于枯草杆菌、某些噬菌体和高等真核细胞的染色体等许多DNA来说，都是双向复制，所以银颗粒的密度分布应该是中间密度低，两端密度高；而对于大肠杆菌噬菌体P2、质体和真核细胞线粒体等某些DNA来说，复制是单向的，则银颗粒的密度分布应该是一端高、一端低。

91.DNA复制需要RNA引物的证据有哪些？
[答] 首先，所有研究过的DNA聚合酶都只有链延伸活性，而没有起始链合成的功能。相反，RNA聚合酶却具有起始链合成和链延伸的活性。另外，一系列实验提供了有关的证据：例如在体外试验中，噬菌体M13单链环状DNA在加入一段RNA引物之后，DNA聚合酶才能把单链环状DNA变成双链环状DNA；同时发现如果加入RNA聚合酶抑制剂利福平，也可以抑制M13 DNA的复制，如果加入RNA引物再加利福平，DNA的合成不被抑制；还发现新合成的DNA片段5′端共价连接着RNA片段，如多瘤病毒在体外系统合成的冈崎片段5′端有长约10个残基的以5′-三磷酸结尾的RNA引物。

92.已知大肠杆菌长度为1100μm，它的复制是在一世代大约40分钟内通过一个复制叉完成的，试求其复制体的链增长速度。
[答] 按照Watson-Crick模型，每3.4nm（或3.4×10-3μm）含有10对核苷酸，那么该DNA含有：1100×10╱3.4×10-3≈3.24×106（核苷酸对）
所以其复制体的链增长速度为：3.24×106╱40×60≈1350（核苷酸/秒）。

93.若使15N标记的大肠杆菌在14N培养基中生长三代，提取DNA，并用平衡沉降法测定DNA密度，其14N-DNA分子与14N－15N杂合DNA分子之比应为多少？
[答] 15N标记的大肠杆菌利用培养基中的14N合成DNA，第一代DNA双链都是14N－15N杂合DNA分子。第二代分别是以第一代中的14N和15N链作为母链合成新的DNA，所以14N－DNA分子与14N－15N杂合DNA分子之比为1：1。第三代中的14N和15N母链的分子之比是3：1，所以14N－DNA分子与14N－15N杂合DNA分子之比应为3：1。

94.DNA和RNA各有几种合成方式，各由什么酶催化新链的合成？
[答]（1）DNA → DNA，其中DNA半不连续复制需要DNA聚合酶III、DNA聚合酶I和DNA连接酶；DNA修复合成需要DNA聚合酶I、DNA连接酶。（2）RNA → DNA， RNA指导下反向转录合成DNA需要逆转录酶。（3）RNA合成包括：DNA → RNA，以DNA为模板转录合成RNA需要RNA聚合酶；RNA → RNA，以RNA为模板合成RNA需要RNA复制酶； RNA → DNA → RNA需要RNA转录酶和RNA聚合酶。

95.真核生物DNA聚合酶有哪几种？它们的主要功能是什么？
[答] 真核生物的DNA聚合酶有α、β、γ、δ、ε五种，均具有5′→ 3′聚合酶活性，DNA聚合酶γ、δ和ε有3′→5′外切酶活性，DNA聚合酶α和β无外切酶活性。DNA聚合酶α用于合成引物，DNA聚合酶δ用于合成细胞核DNA，DNA聚合酶β和ε主要起修复作用，DNA聚合酶γ用于线粒体DNA的合成。

96.要说明原核生物的转录过程。
[答] 原核生物大肠杆菌转录过程大致可以模板的识别、转录的起始、转录的延伸和终止4个阶段。RNA聚合酶在σ亚基引导下，识别并结合到启动子上，然后在与RNA聚合酶结合的部位，DNA双链局部被解开。在转录的起始阶段，酶继续结合在启动子上催化合成RNA链最初2～9个核苷酸。随后σ亚基即脱离核心酶，并离开启动子，起始阶段至此结束，转录进入延伸阶段。在延伸阶段核心酶一直沿着DNA分子向前移动，解链区也跟着移动，新生RNA链得以延长，直至RNA聚合酶识别DNA上的终止子，转录终止，酶与RNA链离开模板。核心酶具有基本的转录功能，对于转录的全过程都是需要的，而识别启动子和起始转录还需要σ亚基，识别转录终止信号和终止转录还需要终止因子Nus A 参与。

97.原核生物RNA聚合酶是如何找到启动子的？真核生物RNA聚合酶与之相比有何异同？
[答] 大肠杆菌RNA聚合酶在σ亚基引导下识别并结合到启动子上。单独的核心酶也能与DNA结合，σ因子的存在对核心酶的构象有较大影响，极大降低了RNA聚合酶与DNA一般序列的结合常数和停留时间。RNA聚合酶可通过扩散与DNA任意部位结合，这种结合是松散的，并且是可逆的。全酶不断变化与DNA结合部位，直到遇上启动子序列，随即有疏松结合转变为牢固结合，并且DNA双链被局部解开。真核生物基因组远大于原核生物，它们的RNA聚合酶也更为复杂。真核生物RNA聚合酶主要有三类：RNA聚合酶I 转录45SrRNA前体，经转录后加工产生5.8SrRNA，18SrRNA和28SrRNA。RNA聚合酶II转录所有的mRNA前体和大多数SnRNA。RNA聚合酶III转录所tRNA，5SrRNA等小分子转录物。真核生物RNA聚合酶的转录过程大体于细菌相似，所不同的是真核生物RNA聚合酶自身不能识别和结合到启动子上，而需要在启动子上有转录因子和RNA聚合酶装配成活性转录复合物才能起始转录。

98.真核生物三类启动子各有何结构特点？
[答] 真核生物三类启动子分别由RNA聚合酶I、II、III进行转录。类别I启动子包括核心启动子和上游控制元件两部分，需要UBF1和SL1因子参与作用。类别II启动子包括四类控制元件：基本启动子、起始子、上游元件和应答元件。识别这些元件的反式作用因子由通用转录因子、上游转录因子和可诱导的因子。类别III启动子有两类：上游启动子和基因内启动子，分别由装配因子和起始因子促进转录起始复合物的形成和转录。

99.细胞内至少要有几种tRNA才能识别64个密码子？
[答] 在遗传密码被破译后，由于有61个密码子编码氨基酸，人们曾预测细胞内有61种tRNA，但事实上绝大多数细胞内只有50种左右，Crick因此提出了摇摆假说，并合理解释了这种情况。根据摇摆性和61个密码子，经过仔细计算，要翻译61个密码子至少需要31种tRNA，外加1个起始tRNA，共需32种。但是，在叶绿体和线粒体内，由于基因组很小，用到的密码子少，因此叶绿体内有30种左右tRNA，线粒体中只有24种。

100.什么是无细胞翻译系统，一个无细胞翻译系统需要哪些基本成分？常用的无细胞翻译系统有哪些？
[答] 无细胞翻译系统指保留蛋白质生物合成能力的细胞抽取物。无细胞系统要包含以下成分：核糖体、各种tRNA、各种氨酰-tRNA合成酶、蛋白质合成需要的起始因子和延伸因子以及终止释放因子、GTP、ATP、20种基本的氨基酸。常见的无细胞翻译系统有：大肠杆菌无细胞翻译系统、兔网织红细胞无细胞翻译系统、麦胚无细胞翻译系统和某些肿瘤细胞制备成的无细胞翻译系统。

101.简述原核细胞和真核生物蛋白质合成的主要区别（青岛海洋大学2001年考研题）。
[答] 原核生物蛋白质合成与真核生物蛋白质合成的主要差别有：（1）原核生物翻译与转录是偶联的，真核生物要将细胞核内转录生成的mRNA转运到细胞质才能进行蛋白质合成，因此，转录和翻不可能偶联。（2）原核生物肽链的合成是从甲酰甲硫氨酰-tRNA开始的，真核生物的肽链合成是从甲硫氨酰-tRNA开始的。（3）原核生物肽链合成的起始依赖于SD序列，真核生物肽链合成的起始依赖于帽子结构。（4）原核生物的mRNA与核糖体小亚基的结合先于起始tRNA与小亚基的结合，而真核生物的起始tRNA与核糖体小亚基的结合先于mRNA与小亚基的结合。（5）在原核生物蛋白质合成的起始阶段，不需要消耗ATP，但真核生物需要消耗ATP。（6）参与真核生物蛋白质合成起始阶段的起始因子比原核生物复杂，释放因子则相对简单。（7）原核生物与真核生物在密码子的偏爱性上有所不同。（8）真核细胞的翻译后加工比原核细胞复杂。

102.在原核细胞中高效表达真核细胞的基因要注意哪些问题？
[答] 要想在原核细胞中高效地表达真核生物的基因必须注意以下几点：（1）对于含有内含子的基因不能直接从基因组中获取，可以通过人工合成的方法或者从cDNA库中获取。（2）需要在真核生物基因的上游加入SD序列。（3）使用原核生物的强启动子。（4）如果人工合成某一蛋白质的基因，需要考虑原核生物对密码子的偏爱性。（5）为了防止原核生物分解目的蛋白，可以考虑分泌表达和融合表达等方法。（6）需要较复杂翻译后加工的蛋白质最好不用原核细胞表达。

103.论述遗传密码的特点。
[答]（1）遗传密码为三联体：模板从mRNA5′端的起始密码子开始，到3′端的终止密码称为开放读码框架。在框架内每3个碱基组成1个密码子，决定1个氨基酸。（2）遗传密码的种类：遗传密码共64个，其中61个密码子分别代表各种氨基酸。3个为肽链合成的终止信号。位于5′端的AUG，除了代表甲硫蛋氨酸外，还是肽链合成的起始信号。（3）遗传密码的连续性：对mRNA分子上密码子的阅读方法叫读码。正确读码是每3个相邻碱基一组，不间断地连续读下去，直到出现终止密码为止。mRNA上碱基的插入和缺失，可导致框移突变。（4）遗传密码的简并性：有61个密码子代表20种氨基酸，每个密码子只代表一种氨基酸，而多数氨基酸都有2～4个密码子，这种由几个密码子编码同一氨基酸的现象称为简并性。从密码表上可看出密码子的第3位碱基通常是简并的。（5）遗传密码的摆动性：指密码子与反密码子配对不遵从碱基配对规律，此不严格的配对关系称为摆动性。如丙氨酰- tRNA反密码子的第1位碱基I可以与密码子第3位的A、C或U配对。遗传密码的摆动性使一种tRNA可以识别几种代表同一种氨基酸的密码子。（6）遗传密码的通用性：从细菌到人的遗传密码都市通用的，但近年发现哺乳类动物线粒体的蛋白质合成体系中有个别例外。如UAG不代表终止密码子，而代表色氨酸；CUA不代表亮氨酸，而代表苏氨酸。（7）遗传密码的防错系统：由于遗传密码的简并性，有4个密码的氨基酸，其第三位的碱基被替换，仍编码同一种氨基酸，从遗传密码表可以看出，只要遗传密码的第二位是U，则第一位和第三位不论怎么变化，其编码的氨基酸总是疏水性的，如第二位是C，则其编码的氨基酸是非极性的或极性不带电荷的，若第二位为A或G，则编码的氨基酸R基是亲水性的，第一位是A或C，第二位是A或G，则编码的氨基酸R基是碱性的，若前两位是AG则编码的氨基酸R基是酸性的。这些规律使某些核苷酸的替换可以不引起肽链中氨基酸的变化，或被替换的氨基酸理化性质相似。这便是密码的防错系统。

104.一基因的编码序列中发生了一个碱基的突变，那么这个基因的表达产物在结构上、功能上可能发生哪些改变？
[答]（1）基因的编码产物中可能有一氨基酸发生改变，突变成另外一种氨基酸；（2）由于遗传密码的简并性虽然碱基改变，但基因的编码产物可能不变；（3）基因的编码产物可能变短，即突变成终止密码子而终止翻译。

105.如果mRNA上的阅读框已被确定，它将只编码一种多肽的氨基酸顺序。从一蛋白质的已知氨基酸顺序，是否能确定唯一的一种mRNA的核苷酸序列？为什么？
[答] 由于1个密码子只能编码一种氨基酸，在mRNA的开放阅读框确定后，用遗传密码可以推出其相应蛋白质的氨基酸序列。由于mRNA是由DNA转录而来的，如果基因（DNA）编码区的序列已知，也可由此推出相应表达产物的氨基酸序列。但是，由于除甲硫氨酸和色氨酸外的18种氨基酸均有一种以上的密码子，由蛋白质的氨基酸序列推断相应mRNA的核苷酸序列时，我们会面临多种选择。比如，由7个氨基酸的序列推测其可能的mRNA编码区序列，若其中有5个氨基酸有2个密码，则能够与其相对应的核苷酸序列会有25种，即有32种。

106.如果E.Coli 染色体DNA的75%可用来编码蛋白质，假定蛋白质的平均相对分子质量为60000，以三个碱基编码一个氨基酸计算，（1）若该染色体DNA大约能编码2000种蛋白质，求该染色体DNA的长度？（2）该染色体DNA的相对分子质量大约是多少？（氨基酸残基的平均相对分子质量是120，核苷酸对的平均相对分子质量是640）。
[答]（1）因为蛋白质的平均相对分子质量为60000，氨基酸残基的平均相对分子质量为120，则蛋白质的平均氨基酸残基的个数为60000/120=500个，编码2000种蛋白至少需要2000×500×3个密码子，而DNA碱基的75%用来编码这2000 个蛋白，则该染色体DNA的长度为：2000×500×3/75%=4000000bp。若该DNA为B-DNA，每个bp使螺旋轴延伸0.34nm，则其长度应为：0.34×4000000=1360000nm；（2）该染色体DNA的相对分子质量大约是640×4000000= 2560000000=2.56×109 Da。

107.原核生物与真核生物翻译起始阶段有何异同？
[答] 相同之处：（1）都需生成翻译起始复合物；（2）都需多种起始因子参加；（3）翻译起始的第一步都需核糖体的大、小亚基先分开；（4）都需要mRNA和氨酰- tRNA结合到核糖体的小亚基上；（5）mRNA在小亚基上就位都需一定的结构成分协助。（6）小亚基结合mRNA和起始者tRNA后，才能与大亚基结合。（7）都需要消耗能量。不同之处：（1）真核生物核糖体是80S（40S+60S）；eIF种类多（10多种）；起始氨酰- tRNA是met- tRNA（不需甲酰化），mRNA没有SD序列；mRNA在小亚基上就位需5′端帽子结构和帽结合蛋白以及eIF2；mRNA先于met-tRNA结合到小亚基上。（2）原核生物核糖体是70S（30S+50S）；IF种类少（3种）；起始氨酰- tRNA是fmet- tRNA（需甲酰化）；需SD序列与16S-tRNA配对结合，rps-1辩认识别序列；小亚基与起始氨酰-tRNA结合后，才与mRNA结合。

108.原核生物的肽链延长需要哪三种蛋白质因子参与？它们各自有何功能？
[答] 原核生物肽链的延长反应需要三种延长因子，即EF-Tu、EF-Ts和EF-G。EF-Tu先与GTP结合成活性状态，然后携带一个由mRNA上的密码子指导的氨酰- tRNA进入到核糖体的A部位。EF-Tu具有高度的选择性，它能识别除fMet- 外的所有氨酰- tRNA。EF-Ts的作用是把EF-Tu从因GTP水解而形成的EF-Tu?GDP复合物中释放出来，再与另一分子的GTP结合，重新形成EF-Tu?GTP活性形式。EF-G（即移位酶）在GTP的参与下，使肽基-tRNA从A部位移到P部位，使A部位空出来以便开始下一轮延长反应。

109.尽管IF-2、EF-Tu、EF-G和RF-3在蛋白质合成中的作用显著不同，然而这四种蛋白质都有一个氨基酸序列十分相似的结构域。你估计此结构域的功能会是什么？
[答] 这四种蛋白质都能够结合GTP，并且有GTPaee的活性，因而都属于G蛋白超家族的成员。它们参与结合GTP的结构域在氨基酸序列上会有很大的相似性。

110.（1）合成由600个氨基酸残基组成的大肠杆菌某蛋白时需水解多少个磷酸酐键？（2）蛋白质的合成为什么需要消耗这样多的自由能？（计算时不考虑合成氨基酸、mRNA、tRNA或核糖体所需的能量）。
[答] （1）在蛋白质的合成中，每个氨基酸的活化伴随着两个磷酸酐键的水解。活化反应由氨酰-tRNA合成酶催化：氨基酸+ tRNA+ATP→氨酰-tRNA+AMP+PPi，PPi+H2O→2Pi，在蛋白质合成形成起始复合物的过程中，涉及一分子GTP的磷酸酐键（GTP→GDP+Pi）被水解，在延长反应中，有两分子GTP的磷酸酐键（2GTP→2GDP+2Pi）被水解。因此，在第一个肽键的形成中，共有7个磷酸酐键被水解。其后每延长一个氨基酸残基涉及4个磷酸酐键的水解（包括氨基酸的活化和延长反应）。蛋白质合成的终止涉及一分子GTP磷酸酐键的水解。一分子的GTP在能量上相当于一分子的ATP。因此，合成含600个残基的蛋白质总共需要消耗2400分子的ATP。（2）因为所有的不可逆过程都伴随总熵增，当蛋白质合成时，局部的熵减只能通过输入大量的自由能来达到。另外，为了确保氨基序列符合遗传密码的指令，肽链每延长1个氨基酸残基，都要分成多个步骤，有多种因子参与，能量消耗会因此而明显增加。

111.肽链合成后的加工修饰有哪些途径？
[答] 蛋白质合成后的加工修饰内容有：（1）肽链的剪切：如切除N端的Met，切除信号肽，切除蛋白质前体中的特定肽段。（2）氨基酸侧链的修饰，如：磷酸化、糖基化、甲基化等。（3）二硫键的形成。（4）与辅基的结合。

112.简述干扰素抑制病毒繁殖的机制。
[答] （1）干扰素与双链RNA可共同活化一种蛋白激酶，此激酶使真核生物起始因子eIF-2发生磷酸化，失去功能而抑制蛋白质合成。（2）干扰素与双链RNA可共同活化2′-5′A寡核苷酸合成酶，生成产物2′-5′A。此产物进一步活化核酸内切酶，而使mRNA降解。

113.为什么翻译能被一段与mRNA互补的序列（即反义RNA）抑制？
[答] 核糖体不能翻译双链RNA。由于互补的反义RNA同mRNA的结合形成了双链，因此使该mRNA不能被翻译。

114.在基因表达的转录水平调控中，为什么真核生物多为正调控，而原核生物多为负调控？
[答]（1）真核生物以正调控为主的必要性与优越性如下： a.真核生物基因组大，某一种cis-factor（顺式作用位点）出现的几率高，可与多种trans-factor（反式作用因子）结合，体现调控的灵活性。b.真核生物的调控一般有大于或等于5组trans-factor-cis-factor参与，随机出现5组完全相同的几率小，体现调控的严谨性。C．真核生物中特异基因表达导致细胞分化。如果10%基因表达，即90%基因关闭，若采用负调控，则需要表达90%基因的阻遏蛋白；若采用正调控，只需要合成10%基因的反式作用因子，这显然是经济合理的调控方式。（2）原核生物为负调控的必要性与优越性如下：原核生物基因组小，基因少，简单，生命繁殖快；所以一般用一种调节蛋白调节一组功能相关的基因（即操纵子）一开俱开，一关俱关，减少不必要的环节。即使调节蛋白失活，酶系统可照样合成，只不过有点浪费而已，而决不会使细胞因缺乏该酶系统而造成致命的后果。

115.一个基因如何产生多种不同类型的mRNA分子？
[答] 一个基因产生一种以上mRNA的方式主要有两种。第一种是：一个原初转录物含有一个以上的多腺苷化位点，就能产生一种以上的具有不同3ˊ末端的mRNA。第二种是：如果一个原初转录物含有几个外显子，那么，会发生不同的剪接，就会产生多种mRNA。此外，RNA编辑可以通过某些核苷酸的修饰，插入或缺失，产生不同类型的mRNA。

116.自然质粒通常需要改造，才能成为理想的质粒载体，请问质粒改造包括哪些基本内容？
[答] 基本内容包括：（1）删除一些非必要的区段及对宿主有不良影响的区段，减少DNA的长度，使载体具有更大的容纳外源片段的能力。（2）插入易于选择或检测的标记。（3）插入限制性内切核酸酶的酶切位点，便于外源基因插入到载体中的特定位置。（4）插入一些调控元件，有利于克隆基因的表达。（5）进行安全性能改造，限定载体的宿主范围。

117.什么是基因组文库（genomic library）？构建基因组文库涉及哪些基本过程？它同遗传学上的基因库有什么不同？
[答] 基因组文库是用基因工程的方法，人工构建的含有某一生物基因组DNA的各种片段的克隆群。一般以改造的噬菌体DNA或粘粒作载体，包括下列过程：（1）大片段高分子量染色体DNA的制备；（2）体外重组连接；（3）包装蛋白的制备；（4）重组体的体外包装；（5）将重组DNA导入寄主细胞；（6）在基因组文库的构建中，由于使用的载体不同，分为噬菌体载体和粘粒载体构建基因组文库、YAC文库、BAC文库等。基因组文库和遗传学上的基因库是完全不同的概念。基因库（gene pool）是指在进行有性生殖的某一群体中，能进行生殖的个体所含总的遗传信息。

118.举例说明基因表达的诱导与阻遏，正调控与负调控。
[答] 在特定的环境信号刺激下，相应的基因被激活，基因表达产物增加，则这种基因是可诱导的。可诱导基因在特定的环境中表达增强的过程称为诱导。例如有DNA损伤时，修复酶基因就会在细菌内被诱导激活，使修复酶的活性增加。相反，如果基因对环境信号应答时被抑制则这种基因是可阻遏的，可阻遏基因表达产物水平降低的过程称为阻遏，例如，当培养液中色氨酸供应充分时，在细菌内编码色氨酸合成相关酶的基因表达会被抑制。如果某种基因在没有调节蛋白存在时是表达的，加入某种调节蛋白后基因表达活性便被关闭，这样的控制为负调控。例如，乳糖操纵子。相反，若某种基因在没有调节蛋白存在时是关闭的，加入某种调节蛋白后基因活性就被开启，这种控制称为正调控。例如代谢物阻遏。

119.在lac操纵子中，（1）lac操纵基因的突变，（2）lacI基因的突变，（3）启动子的突变将会对结构基因表达产生什么影响。
[答]（1）在操纵基因中所发生的大多数突变都会导致阻遏蛋白同操纵基因的结合能力减弱或丧失，这将会导致结构基因的组成型表达。（2）如果突变性阻遏蛋白与操纵基因的结合能力减弱或丧失，结构基因会组成型表达；如果突变破坏了阻遏蛋白同乳糖和相关的化合物结合的能力，将会阻止结构基因的表达。（3）突变会使启动子变得更强或更弱，或是增强或是减弱结构基因的表达。

120.概述原核生物基因表达调控的特点。
[答] 原核基因表达调控与真核存在很多共同之处，但因原核生物没有细胞核和亚细胞结构，其基因组结构要比真核生物简单，基因表达的调控因此而比较简单。虽然原核基因的表达也受转录起始、转录终止、翻译调控及RNA、蛋白质的稳定性等多级调控，但其表达开、关的关键机制主要发生在转录起始。其特点包括以下3方面：（1）σ因子决定RNA聚合酶的识别特异性：原核生物只有一种RNA聚合酶，核心酶催化转录的延长，亚基识别特异启动序列，即不同的因子协助启动不同基因的转录。（2）操纵子模型的普遍性：除个别基因外，原核生物绝大数基因按功能相关性成簇地连续排列在染色体上，共同组成一个转录单位即操纵子，如乳糖操纵子等。一个操纵子含一个启动序列及数个编码基因。在同一个启动序列控制下，转录出多顺反子mRNA。（3）阻遏蛋白与阻遏机制的普遍性：在很多原核操纵子系统，特异的阻遏蛋白是控制启动序列活性的重要因素。当阻遏蛋白与操纵基因结合或解离时，结构基因的转录被阻遏或去阻遏。

121.概述真核生物基因组的特点。
[答]（1）基因组结构庞大：哺乳动物基因组DNA由约 bp的核苷酸组成。大约有3万个左右的基因，90%以上的DNA不为蛋白质编码。真核细胞DNA与组蛋白结合形成复杂的染色质结构，基因表达调控机制更加复杂。（2）单顺反子：真核基因转录产物为单顺反子，即一个编码基因转录生成一个mRNA分子，经翻译生成一条多肽链。许多蛋白质由几条不同的多肽链组成，因此存在多个基因的协调表达。（3）重复序列：重复序列在真核DNA中普遍存在，重复序列长短不一，短的在10个核苷酸以下，长的达数百，乃至上千个核苷酸。据重复频率不同分为高度重复序列、中度重复序列及单拷贝序列。（4）基因的不连续性：结构基因的两侧有不被转录的非编码序列，往往是基因表达的调控区。在编码基因内部有一些不为蛋白质编码的间隔序列，称内含子，而编码序列称外显子，因此真核基因是不连续的。

122.简答真核生物基因表达的调控方式。
[答]（1）DNA水平的调控：a.基因丢失，即DNA片段或部分染色体的丢失，如蛔虫胚胎发育过程有27%的DNA丢失。b.基因扩增，即特定基因在特定阶段的选择性扩增，如非洲爪蟾卵母细胞中的rDNA是体细胞的4000倍。c.DNA序列的重排，如哺乳动物免疫球蛋白各编码区的连接。d.染色质结构的变化，通过异染色质关闭某些基因的表达。e.DNA的修饰，如DNA的甲基化关闭某些基因的活性。（2）转录水平的调控。a.染色质的活化，如核小体结构的解开、非组蛋白的作用等。b.转录因子的作用，转录因子与RNA聚合酶及特定的DNA序列（启动子、增强子）相互作用实现对转录的调控。（3）转录后水平的调控。a.mRNA前体的加工，如5′端加帽、3′端加尾、拼接、修饰、编辑等。B.mRNA的选择性拼接，如抗体基因的选择性拼接。（4）翻译水平的调控。a.控制mRNA的稳定性，如5′端的帽子结构、3′端polyA尾巴和mRNA与蛋白质的结合有利于mRNA的稳定。b.反义RNA的作用，反义RNA可以选择性抑制某些基因的表达。c.选择性翻译，如血红素缺乏时，通过级联反应使eIF2磷酸化。d.抑制翻译的起始。（5）翻译后水平的调控。a.多肽链的加工和折叠，如糖基化、乙酰化、磷酸化、二硫键形成、蛋白质的降解。b.氨基酸的重排，如合成伴刀豆蛋白A时，氨基酸序列大幅度地被剪接重排。c.通过肽链的断裂等的加工方式产生不同的活性多肽。

123.真核生物基因转录的调控因子有哪些重要的结构模体？
[答] 转录调控因子是一类特殊的DNA结合蛋白，也称反式作用因子，能与DNA的顺式作用元件相互作用而调控转录。转录调控因子的种类较多，不同的转录调控因子有不同的结构模体，常见的结构模体有螺旋-转角-螺旋、锌指结构、亮氨酸拉链、螺旋-环-螺旋等。

124.在基因克隆中，目的基因有哪些主要来源？
[答]（1）从染色体DNA中直接分离：主要针对原核生物。（2）化学合成法：由已知多肽的氨基酸序列，推得编码这些氨基酸的核苷酸序列，利用DNA合成仪人工合成其基因。（3）从基因组DNA文库中筛选分离组织/细胞染色体DNA：利用限制性核酸内切酶将染色体DNA切割成片段，与适当的克隆载体连接后转入受体菌扩增，即获得基因组DNA文库，用核酸探针将所需目的基因从基因文库中“钓”取出来。（4）从文库中筛选cDNA：提取mRNA，利用反转录酶合成与其互补的DNA（cDNA）分子，再复制成双链cDNA片段，与适当载体连接后转入受体菌，即获得cDNA文库，然后采用适当方法从cDNA文库中筛选出目的cDNA。（5）用PCR从基因组DNA或cDNA中扩增目的基因。

125.用于DNA重组的载体应具备什么条件？常用的载体有哪一些？各有何特点？
[答] DNA重组载体应具备的条件：（1）能自主复制；（2）具有一种或多种限制性内切酶的单一切割位点，并在位点中插入外源基因后，不影响其复制功能；（3）具有1～2个筛选标记；（4）克隆载体必须是安全的，不应含有对受体细胞有害的基因，并且不会任意转入其他生物细胞；（5）易于操作，转化效率高。常用的基因载体有以下几种：（1）质粒：是细菌染色体以外的小型环状双链DNA分子，本身有复制功能，且带有某些选择信息，但可插入的目的基因片段较小。（2）噬菌体DNA：是一种病毒DNA，能插入比较大的外源DNA片段，在DNA分子上有多种限制性核酸内切酶识别位点，便于多种外源DNA酶切片段的克隆。（4）柯斯质粒载体和酵母人工染色体：前者结合了质粒和噬菌体载体的优点，也是一种环形双链DNA分子，具有质粒的性质，可以转化大肠杆菌，并自行复制和增殖，但它不会产生子代噬菌体，构建成的此种载体较小，因此能插入比较大的外源DNA片段，所以被广泛地用于构建基因组文库。后者既含有大肠杆菌来源的质粒复制起始位点，又含有酵母菌染色体DNA着丝点，端粒和复制起始位点的序列，以及合适的选择标记基因，可在转化的酵母菌细胞内，按染色体DNA复制的形式复制重组DNA，容纳外源DNA片段的能力比前3种载体大得多。

126.什么是DNA重组（基因克隆）？简述DNA重组的步骤及其用途。
[答] 基因克隆（gene cloning）是指含有单一DNA重组体的无性系或指将DNA重组体引进受体细胞中，建立无性系的过程。一个完整的基因克隆过程包括：（1）选择合适的目的基因和栽体；（2）用限制性内切酶处理目的基因和栽体；（3）连接目的基因与栽体；（4）将重组体导入受体细胞。（5）筛选转化细胞并扩大培养。基因克隆技术可用于构建基因组文库和cDNA文库，也可以用于克隆某一特定的基因，对其进行序列分析和功能研究。

127.原核表达载体应具备哪些基本的结构元件？
[答] （1）有适宜的选择标志；（2）具有能调控转录、产生大量mRNA的强启动子，如lac启动子或其他启动子系列；（3）含适当的翻译控制序列，如核糖体结合位点和翻译起始点等；（4）含有合理设计的多接头克隆位点，以确保目的基因按一定方向与载体正确衔接。

128.概述筛选和鉴定DNA重组体的常用方法。
[答] 在转基因操作以后，载体只能进入部分宿主细胞，即使含有载体的细胞，也并非都含有目的基因，有些宿主细胞可能含有自身连接成环的载体分子或非目的基因与载体形成的重组体。因此，须在不同层次不同水平上进行筛选和鉴定，以确定哪一菌落所含的重组DNA分子确实带有目的基因，这一过程为筛选。根据载体体系、宿主细胞特性及外源基因在受体细胞表达情况的不同，可采用：（1）直接选择法：针对载体携带某种或某些标志基因和目的基因，直接测定该基因或基因表型的方法。a.抗药标志的筛选：载体具有某种抗生素的抗性基因，在转化后只有含载体的细菌才能在含该抗生素的培养平板上生长并形成单菌落，而未转化细胞则不能生长，这样即可将转化菌与非转化菌区别开来。b.插入失活法：将目的基因插入载体某一耐药基因内使该基因失活，可区分单纯载体或重组载体（含目的基因）的转化菌落。如pBR322含ampr、Tetr双抗药基因，若将目的基因插入载体的Tetr基因中，则含目的基因的转化细胞只能在含Amp的培养液中生长，而不能在含Tet的培养液中生长。c.标志补救：若克隆的基因能在宿主菌表达，且表达产物与宿主菌的营养缺陷互补，那么就可以利用营养突变菌株进行筛选，这称为标志补救。如重组体为亮氨酸自养型（Leu+），将重组子导入亮氨酸异养型（Leu-）的宿主细胞后，在不含Leu的培养液中可生长，而不含重组体的细胞则不能生长。 -互补法筛选（见43题）也是一种标志补救选择方法。d.酶切图谱筛选：分别挑取独立的菌落，培养后快速提取重组体DNA，用重组时所采用的限制酶切割后，进行琼脂糖凝胶电泳，可以从DNA片段的大小和有无判断所选的菌落是否为阳性克隆。e.核酸杂交筛选：将转化子DNA或克隆的DNA分子片段转移至合适的膜上，利用标记探针进行杂交，直接选择并鉴定目的基因。f.原位杂交筛选：是将待选菌在平板上培养成菌落，按相应位置（原位）转移至合适的膜上，经变性使膜上的DNA成单链，再与标记的探针（与目的基因互补）杂交，找出平板上的菌落位置，即为重组的阳性菌落。（2）免疫学方法筛选：利用特异抗体与目的基因表达产物的特异相互作用进行筛选。这种方法不直接鉴定基因，属非直接筛选法。分为免疫化学方法及酶联免疫检测分析等。基本的工作原理是将琼脂培养板上的转化子菌落经氯仿蒸汽裂解、释放抗原，再将固定有抗血清的膜覆盖在裂解菌落上，在膜上得到抗原抗体复合物，最后用合适的方法检出阳性反应菌落。

129.为什么蓝白斑选择法有时会出现假阳性？
[答] -半乳糖苷酶的N端可以进行修饰，有时并不影响酶的活性或肽的互补性。如果插入的外源DNA引起肽的可读框的改变，或者插入片段在正确的可读框中含有终止密码的话，就会形成白色菌落或噬菌斑。如果插入DNA的碱基数正好是3的倍数，或者插入的DNA中不含有终止密码的话，仍然会形成蓝色噬菌斑。这种插入物的长度可达几百个碱基对。M13载体的这种性质可以用来检测和选择产生新终止密码的突变，也可以用来检测移码突变。

130.将重组DNA导入细胞内有哪些方法？
[答] （1）将重组质粒导入原核细胞称转化，通常用氯化钙法使大肠杆菌细胞处于感受态，从而将外源DNA导入细胞。另一个常用方法是用脉冲高压电瞬间处理，使外源DNA高效导入细胞，称为电穿孔法。(2)将重组体DNA包装成噬菌体，使外源基因导入宿主细胞称转导，在适宜条件下使转化率提高。（3）将外源基因导入动物细胞常用方法有磷酸钙转染技术，电穿孔转染技术，脂质体载体法，DEAE-葡聚糖转染技术，显微注射法等。将外源基因导入植物细胞常用方法是用Ti质粒将外源基因导入植物的外植体，也可将植物细胞的细胞壁消化，再用将外源基因导入动物细胞常用方法将外源基因导入原生质体，再诱导产生细胞壁。还有一个方法，是用基因枪将外源DNA射入植物组织或细胞。

131.分析蛋白质融合表达和非融合表达的利弊。
[答] （1）外源基因的活性蛋白质第一个氨基酸可能不是甲硫氨酸，表达融合蛋白有利于肽链合成的起始。（2）蛋白质的N端序列对其合成和折叠有较大影响，如外源基因在宿主细胞内表达量过低，将其与宿主细胞表达基因N端序列融合，可以提高表达水平。（3）外源蛋白在宿主细胞内往往不稳定，易被宿主细胞蛋白酶降解，含有宿主蛋白N端序列的融合蛋白则比较稳定。（4）融合蛋白不影响某些表位结构，可用于抗体工程。（5）某些融合蛋白易于分离纯化和检测。

132.概述基因定点诱变的常用方法。
[答] 目前常用的定位诱变方法主要有：（1）酶切诱变：先选择合适的限制酶将基因切开，然后插入或删除有关序列，可以在切点处改造基因序列。（2）寡核苷酸指导的诱变：a.制备单链DNA模板；b.合成诱变寡核苷酸；c.寡核苷酸与模板退火并合成异源双链DNA；d.将异源双链DNA插入合适的载体；e.转染宿主细胞；f.筛选和鉴定突变体。（3）PCR诱变：在引物中引入非配对碱基，通过PCR引物可以在扩增产物中引入点突变，嵌套式PCR还可以在基因内部或在一次PCR中同时在多处引入变异。各种变异，包括插入、删除、置换和重组，都可用PCR的方法来进行。

133.什么是蛋白质工程？举例说明蛋白质工程的意义。
[答] 蛋白质工程是通过对蛋白质及酶的化学修饰及基因改造获得具有特殊功能的非天然蛋白质的技术。主要是根据蛋白质的结构和功能间的相互关系，利用基因工程技术，或用化学方法合成基因、改造基因，以便合成新的蛋白质，或改变蛋白质的活性、功能以及溶解性等。
几乎所有类型具有开发前景的蛋白质和多肽均有用蛋白质工程改造的尝试，并取得不同程度的成果。例如，水蛭素是水蛭唾液腺分泌的凝血酶特异抑制剂，它有多种变异体，由65或66个氨基酸组成。水蛭素在临床上可作为抗血栓药物用于治疗血栓病。为提高水蛭素活性，在综合各变异体结构特点的基础上提出改造水蛭素，将47位的Asn变为Lys，使其与分子内Thr4或Asp5间形成氢键来帮助水蛭素N端肽段正确取向，从而提高抗凝血效率，试管实验提高达4倍，在动物模型上检验抗血栓形成的效果提高20倍。

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怎么用VSEPR判断N2O分子构型

2011-04-15T16:57:00.000-07:00

Fool-proof 规则：

1) 计算出所有的价电子数（包括所带电荷数）。

N2O：共有16个价电子 (5+5+6)
2）以单键形式将相关原子联系起来。

一般来说，电负性小的原子占据中心，电负性大的原子占据外围。N2O：N为中心，氧和另一个氮在外围。
3）用总价电子数减去上述单键所用的电子数。

N2O：两个单键，共四个电子被用掉了，16－4=12。即还剩有12个电子。
4）将剩余的电子给与外围的各原子使其达到“八偶体”（即有八个电子）。

N2O：12个电子给与外围的氧原子和另一个氮。每个外围原子有三对孤对电子和一对成键电子。
5）如还有电子剩余，给与中心原子。如无，继续。
6）检查中心原子是否达到“八偶体”。如是，完成；如否，须将外围原子上的孤对电子移入，与中心原子形成多重键。N2O：中心氮原子只有两对单键，共四个电子。所以，须将外围氮原子上的两对孤对电子移入共用，与中心氮原子形成三键---中心氮原子达到八偶体。
7）根据中心氮原子的电子构型来决定分子结构。

中心氮原子只含键合电子（所有键合都被考虑成是单键），无孤对电子。所以，两组键合电子以180 度分离斥力最小＝＝＝》线性分子（或sp杂化）。

(http://zhidao.baidu.com/question/250640006.html)










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